2000 Fiscal Year Annual Research Report

CTLA-4の発現制御に基づく新たな免疫抑制法の開発

Research Project

Project/Area Number	12557021
Research Institution	Chiba University
Principal Investigator	斉藤隆千葉大学, 大学院・医学研究科, 教授 (50205655)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山崎晶千葉大学, 大学院・医学研究科, 助手 (40312946)
Keywords	CTLA-4 / AP-2 / リソソーム / T細胞活性化 / ネガティブシグナル / 阻害物質 / スクリーニング / 酵母2ハイブリッド
Research Abstract	CTLA-4の細胞内局在と細胞表面への発現制御のメカニズムの解析では大きな前進があった。Wild-type CTLA-4を高発現したCD4^+T細胞クローンの細胞内で、CTLA-4が蓄積されている顆粒は、種々の細胞顆粒マーカーとの二重染色からリソソームであることが判明した。AP-2結合サイトの変異CTLA-4でも同様に蓄積するが、細胞内領域を欠損するCTLA-4は殆どが細胞表面にあり、未知のリソソーム移行シグナルを示唆する。刺激がないとリソソーム内に蓄積しているCTLA-4は短時間で分解されてしまうが、TCR刺激で細胞表面発現を増す。TCR活性化によってCTLA-4を含むリソソームは細胞膜に移動し、その内部にあるCTLA-4は細胞表面で高発現になると同時にカテプシンなどのリソソーム特異的酵素も細胞外に分泌されることから、CTLA-4の細胞表面発現制御はTCR活性化に伴うリソソームの分泌制御によることが判明した。一方、既に我々が見いだしたAP-2によるCTLA-4のエンドサイトーシスを阻害することによってCTLA-4の細胞表面発現を増大させ、特異的免疫抑制を誘導する目的で、AP-2のμ2鎖とCTLA-4のチロシンモチーフを阻害する単純化合物を探すためのスクリーニングを酵母2ハイブリッド法を用いて行った。民間企業の研究所とともに、約28万個の化合物をスクリーニングしたが、残念ながら、この結合を特異的に阻害する化合物を得ることはできなかった。ペプチドの方向から阻害分子として探すか、今回の発見の下にリソソームへのターゲティングシグナルを見つけ、その部位に対する阻害剤も検討することが有用と考えられる。

Research Products
(10 results)

All Other

All Publications (10 results)

[Publications] Suzuki,K.: "Janus kinase 3 (Jak 3) is essential for common cytokine receptor γ chain (γc)-dependent signaling : comparative analysis of γc, Jak3, and γc and Jak3 double deficient mice."Int.Immunol.. 12. 123-132 (2000)
[Publications] Fossati-Jimack,L.: "Markedly different pathogenicity of four immunoguloblin Gisotype-switch variants of an antierythrocvte autoantibody is based on their capacity to interact in vivo with low-affinity Fcγ receptor III."J.Exp.Med.. 191. 1293-1302 (2000)
[Publications] Hamano,Y.: "Immune complex and Fc receptor-mediated augmentation of antigen presentation for in vivo helper T cell responses."J.Immunol.. 164. 6113-6119 (2000)
[Publications] Nakatsu,F.: "A di-leucine signal in the ubiquitin moiety : possible involvement in ubiquitination-mediated endocytosis."J.Biol.Chem.. 275. 26213-26219 (2000)
[Publications] Tsujino,S.: "Differential requirement of the cytoplasmic subregions of γc chain in T cell development and function."Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 97. 10514-10519 (2000)
[Publications] Suzuki,K.: "Role of common cytokine receptor γ chain (γc)-and Jak3-dependent signaling in the proliferation and survival of murine mast cells."Blood. 96. 2172-2180 (2000)
[Publications] Iida,T.: "Regulation of cell surface expression of CTLA-4 by secretion of CTLA-4-containing lysosomes upon activation of CD4^+ T cells."J.Immunol. 165. 5062-5068 (2000)
[Publications] Okazaki,Y.: "Cell surface expression of calnexin, a molecular chaperone in the endoplasmic reticulum."J.Biol.Chem.. 275. 35751-35758 (2000)
[Publications] Watanabe,N.: "The quantity of TCR signaling determines positive selection and commitment of cells."J.Immunol. 165. 6252-6261 (2000)
[Publications] Arase,H.: "Negative regulation of expression and function of Fcγ RIII by CD3ζ in murine NK cells."J.Immunol.. 166. 21-25 (2001)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

CTLA-4の発現制御に基づく新たな免疫抑制法の開発

Principal Investigator

斉藤 隆 千葉大学, 大学院・医学研究科, 教授 (50205655)

Research Products

[Publications] Suzuki,K.: "Janus kinase 3 (Jak 3) is essential for common cytokine receptor γ chain (γc)-dependent signaling : comparative analysis of γc, Jak3, and γc and Jak3 double deficient mice."Int.Immunol.. 12. 123-132 (2000)

[Publications] Fossati-Jimack,L.: "Markedly different pathogenicity of four immunoguloblin Gisotype-switch variants of an antierythrocvte autoantibody is based on their capacity to interact in vivo with low-affinity Fcγ receptor III."J.Exp.Med.. 191. 1293-1302 (2000)

[Publications] Hamano,Y.: "Immune complex and Fc receptor-mediated augmentation of antigen presentation for in vivo helper T cell responses."J.Immunol.. 164. 6113-6119 (2000)

[Publications] Nakatsu,F.: "A di-leucine signal in the ubiquitin moiety : possible involvement in ubiquitination-mediated endocytosis."J.Biol.Chem.. 275. 26213-26219 (2000)

[Publications] Tsujino,S.: "Differential requirement of the cytoplasmic subregions of γc chain in T cell development and function."Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 97. 10514-10519 (2000)

[Publications] Suzuki,K.: "Role of common cytokine receptor γ chain (γc)-and Jak3-dependent signaling in the proliferation and survival of murine mast cells."Blood. 96. 2172-2180 (2000)

[Publications] Iida,T.: "Regulation of cell surface expression of CTLA-4 by secretion of CTLA-4-containing lysosomes upon activation of CD4^+ T cells."J.Immunol. 165. 5062-5068 (2000)

[Publications] Okazaki,Y.: "Cell surface expression of calnexin, a molecular chaperone in the endoplasmic reticulum."J.Biol.Chem.. 275. 35751-35758 (2000)

[Publications] Watanabe,N.: "The quantity of TCR signaling determines positive selection and commitment of cells."J.Immunol. 165. 6252-6261 (2000)

[Publications] Arase,H.: "Negative regulation of expression and function of Fcγ RIII by CD3ζ in murine NK cells."J.Immunol.. 166. 21-25 (2001)

斉藤隆千葉大学, 大学院・医学研究科, 教授 (50205655)