オーファンリセプターによる血管リモデリング、血圧調節の分子機序解明と治療への応用

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12557064
• Research Institution: Ehime University
• Principal Investigator: 堀内 正嗣 愛媛大学, 医学部, 教授 (40150338)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 慎山 浩史 ウェルファイド(株), 創薬研究所・創薬第二研究所, 主任研究官 ; 浜井 盟子 愛媛大学, 医学部, 助手 (20180929) ; 岩井 將 愛媛大学, 医学部, 助教授 (00184854)
• Keywords: クローニング / 心血管リモデリング / エンハンサー / サイレンサー / レニン / C-myc / cAMP / おとり型核酸医薬(デコイ)療法

Research Abstract

第二世代の遺伝子治療として、転写調節因子を不活化させるおとり型核酸医薬(デコイ)療法に注目し、血管病変発症改善の分子標的となる転写調節因子及びその特異的結合配列を検索してきた。血管病変発症、血管リモデリングに重要な特異的転写調節因子核内オーファンリセプター、その特異的結合配列の同定は、血管病変の病態生理解明だけでなく、新規薬剤の開発、既存薬剤の新たな適応が期待される。我々は、レニン遺伝子の転写制御領域にエンハンサーとサイレンサーがオーバーラップした、新規の遺伝子配列を見いだし、CNRE(cAMP Responsive and Negative Regulatory Element)と名付け、CNREに結合する特異的転写因子を、Yeast One Hybrid Systemを用い、マウス腎臓cDNAライブラリーよりクローニングしたところ、ヒトLXR(liver X receptor)αと91%のホモロジーを有する、mLXRαを得たが、mLXRαは、レニン及びc-myc遺伝子発現に対して、RXR(retinoid X receptor)をヘテロダイマーとして必要とせず、mLXRαはcAMPにてレニン、c-mycの転写活性を促進した。しかし、mLXRαはCRE(cAMP responsive element)とは、結合せずCREB(CRE binding protein)とは、独立して作用することが明らかとなった。更に、我々はカフを用いたマウス血管傷害モデル、圧負荷心肥大モデルにて、mLXRαの発現増加に伴い、レニン、c-mycの発現が増加し、新生内膜が増殖、心肥大が増強する事が観察され、mLXRαが心血管リモデリングに重要であること、さらに、遺伝子治療の標的となり得ることが示唆された。現在、HVJ-envelopeを使用し、LXR発現ベクター、LXR結合特異的遺伝子配列をデコイとして、培養血管平滑筋細胞、血管傷害モデルに遺伝子導入する実験を開始し、LXR過剰発現により、血管平滑筋細胞の増殖能が増加する可能性を示唆する前段階的実験結果を得ている。

Research Products

• [Publications] Tamura, K., Y.E.Chen., Horiuchi, M., Q, Chen., Z, Yang., Daviet, L., H, Mu., Pratt, R.E., Dzau, V.J.: "A novel function of LXRα as a cAMP-responsive transcriptional Regulator of rennin"Proc. Natl. Acad, Sci. USA. 97. 8513-8518 (2000)