2000 Fiscal Year Annual Research Report
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12557080
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
仲野 徹 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (00172370)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松本 加代子 大阪府赤十字血液センター, 研究部, 課長
木村 透 大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (50280962)
鈴木 聡 大阪大学, 微生物病研究所, 講師 (10311565)
大沢 匡毅 麒麟ビール, 医薬探索研究所, 研究員
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| Keywords | 幹細胞 / 造血 / 胚性幹細胞 / 細胞分化 / 転写因子 / GATA転写因子 / Myb転写因子 |
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| Research Abstract |
胚性幹細胞および、胚性幹細胞から血液細胞への分化誘導法を用いて、転写因子およびその変異体をコンディショナルに発現させる実験を行なった。以下にその概略を示す。
(1)B-Mybの胚性幹細胞における機能の解析
MybのDNA結合ドメイン、ショウジョウバエengrailedのレプレッサードメイン、タモキシフェン(4-OHT)に特異的に結合する変異エストロゲン受容体のリガンド結合ドメイン、の融合タンパクMERT、は、4-OHT存在下でのみ、Myb遺伝子ファミリーの転写能を抑制する。胚性幹細胞は、Myb遺伝子ファミリーのうち、B-Mybのみを発現しており、MERTによって、胚性幹細胞におけるB-Mybの機能を明らかにする実験を行なった。その結果、B-Mybは、従来報告があった細胞周期のみでなく、細胞接着の維持にも非常に大きな役割をはたしていることが明らかになった。
(2)c-Mybの造血における機能解析
MERTを導入した胚性幹細胞を血液細胞へと分化誘導を行ない、その過程において経時的に4-OHTを添加して機能阻害実験を行なったところ、未分化な血液細胞の段階でのみ、c-Mybの機能が重要であることが明らかとなった。
(3)GATA遺伝子群の造血前駆細胞の増殖・分化における機能の解析
テトラサイクリンの存在下において遺伝子発現が抑制されるTet-Offシステムを用いて、GATA-1、GATA-2遺伝子を、胚性幹細胞から血液細胞への分化誘導過程において発現させ、その機能を解析した。GATA-2を造血前駆細胞において発現させると、造血前駆細胞の数が顕著に増加することが明らかになった。このようなシステムを用いることにより、造血前駆細胞の増幅が可能となり、再生医学への応用が期待できる。
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[Publications] T.Era,Y.Takagi,T.Takahashi,J.C.Bories,T.Nakano: "Characterization of hematopoietic lineage specific gene expression by ES cell in vitro differentiation induction system"Blood. 95. 870-878 (2000)
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[Publications] T.Takahashi,N.Suwabe,P.Dai,M.Yamamoto,S.Ishii,T.Nakano: "Inhibitory interaction of c-Myb and GATA-1 via transcriptional co-activator CBP"Oncogene. 19. 134-140 (2000)
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[Publications] Kato,A.M.Morrison,T.Nakano,K.Tashiro,T.Honjo: "ESOP-1, a secreted protein expressed in the hematopoietic, nervous and reproductive systems of embryonic and adult mouse"Blood. 96. 362-364 (2000)
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[Publications] T.Kimura,Y.Sonoda,N.T.Izui,M.Suda,K.Sasaki,T.Nakano: "Proliferation and cell death of embryonic primitive erythrocytes"Exp Hematol. 28. 635-641 (2000)
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[Publications] K.Matsumoto,K.Yasui,Y.Tani,H.Shibata,T.Nakano: "In Vitro proliferation potential of AC133 positive cells in peripheral blood"Stem Cells. 18. 196-203 (2000)
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[Publications] Embryonic stem cell: Internal Medicine. (in press). (2001)
