2000 Fiscal Year Annual Research Report
細胞内脂質の分解誘導による新たな動脈硬化治療法の開発
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12557092
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
石橋 俊 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (90212919)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
原田 賢治 東京大学, 医学部・附属病院, 医員
後藤田 貴也 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (60322062)
島野 仁 筑波大学, 臨床医学系内科, 講師 (20251241)
大橋 健 東京大学, 医学部・附属病院, 医員
大須賀 淳一 東京大学, 医学部・附属病院, 医員
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| Keywords | 動脈硬化 / 泡沫細胞 / マクロファージ / 遺伝子治療 / アデノウイルス / ホルモン感受性リパーゼ / コレステロール / コレステロールエステル |
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| Research Abstract |
アテローム性動脈硬化症はコレステロールエステルを主体に蓄積したマクロファージ/血管平滑筋細胞由来の泡沫細胞の集簇を、基本的な初期病変に認める。この過程の抑制による動脈硬化治療は模索されている。われわれは、細胞内に蓄積した中性脂質を分解する酵素の遺伝子導入によって、泡沫細胞を脱泡沫化する治療の可能性を検討した。
細胞内コレステロールエステルを分解する酵素にはホルモン感受性リパーゼ(HSL)とリソゾーム酸性リパーゼ(LAL)の2種類の酵素が知られており、LPLをCMVプロモーターによって発現する組み換えアデノウィルスを作成した。293細胞に感染させると、HSL蛋白を発現し、CE分解活性の検出された。アデノウィルスのマクロファージ系細胞への感染効率は著しく低いことが知られている。そこで、β-Galを発現するコントロールアデノウイルスを用いて、種々の細胞種における感染効率を比較した。その結果、ヒト単球由来であるTHP-1やU937はマウス由来のP388D1やマウス腹腔マクロファージよりも高い感染効率を確認し、以後THP-1細胞を用いて検討した。アセチルLDLとインキュベートして泡沫化させた細胞にHSL発現の組み換えアデノウイルスを発現させると、コレステロールエステルの蓄積量が著明に減少した。細胞から細胞外へのコレステロールの放出量の変化やABCA-1やLXRαなどのコレステロール逆輸送に関与する遺伝子群の動きについても現在検討を進めている。
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[Publications] Chen Z,Ishibashi S, et al.: "Troglitazone Inhibits Atherosclerosis in Apolipoprotein E-Knockout Mice : Pleiotropic Effects on CD36 Expression and HDL."Arterioscler Thromb Vasc Biol.. 21(3). 372-377 (2001)
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[Publications] Perrey S,Ishibashi S, et al.: "Thiazolidinedione- and tumor necrosis factor alpha-induced downregulation of peroxisome proliferator-activated receptor gamma mRNA in differentiated 3T3-L1 adipocytes."Metabolism. 50(1). 36-40 (2001)
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[Publications] Perrey S,Ishibashi S, et al.: "The LDL receptor is the major pathway for beta-VLDL uptake by mouse peritoneal macrophages."Atherosclerosis. 154(1). 51-60 (2001)
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[Publications] "Absence of ACAT-1 attenuates atherosclerosis but causesdry eye and cutaneous xanthomatosis in mice with congenital hyperlipidemia."J Biol Chem.. 275(28). 21324-30 (2000)
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[Publications] Osuga J,Ishibashi S, et al.: "Targeted disruption of hormone-sensitive lipase results in male sterility and adipocyte hypertrophy, but not in obesity."Proc Natl Acad Sci U S A.. 97(2). 787-92 (2000)
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[Publications] Tozawa R,Ishibashi S, et al.: "Embryonic lethality and defective neural tube closure in mice lacking squalene synthase."J Biol Chem.. 274(43). 30843-8 (1999)
