肝再生誘導法の開発を目指した新規分化誘導因子の探索

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12557096
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 谷口 英樹 筑波大学, 臨床医学系, 講師 (70292555)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 江藤 譲 味の素医薬研究所, 創薬, 主席研究員 ; 中内 啓光 筑波大学, 基礎医学系, 教授 (40175485)
• Keywords: 肝臓 / 再生 / 幹細胞 / 再生医学

Research Abstract

単離した肝細胞集団の中から、多能性を持つ肝幹細胞をFACS(Fluorescence activated cell sorter)とモノクローナル抗体を用いた細胞分離法により濃縮・純化し、それらの機能解析を行うことを目的として研究を行った。まず、肝前駆細胞の同定を行い、c-Kit-CD49f+CD29+ CD45-TER119-細胞中に限定して増殖能の高いコロニー形成能を有した前駆細胞が存在し、肝細胞と胆管細胞という異なる細胞系列へと分化し得ることを明らかにした(Hepatology 32(6):1230-1239,2000.)。さらに、c-Kit-CD49f+CD29+CD45-TER119-細胞の画分化を段階的にすすめ、自己増殖能をも備えた幹細胞画分を明らかにすることを試みた。その結果、c-Met+c-Kit-CD49f+/lowCD29+ CD45-TER119-細胞中に限定して増殖能、多分化能、自己複製能、組織再構築能を兼ね備えた肝幹細胞(hepatic stem cell)が高頻度に存在することが判明した。そして、この肝幹細胞の自己複製に必須の液性因子がある細胞株の培養上清中に存在することを明らかにしており、現在タンパク精製によるクローニングを試みている。今後、さらに、この因子の肝幹細胞の分化・増殖・自己複製機構における役割を解析し、「臓器再生治療薬」として有用か否かを検証する予定である。

Research Products

• [Publications] A.Suzuki,H.Taniguchi et al: "Flowcytometric separation and enrichment of multipotent hepatic progenitor cells in mouse developing liver"Hepatology. 32. 1230-1239 (2000)
• [Publications] H.Taniguchi et al: "Usefulness of flowcytometric cell sorting for enrichment of hepatic stem cells in the liver"Transplantation Proceedings. 32. 249-251 (2000)
• [Publications] H.Taniguchi et al: "Clonogenic colony forming ability of flowcytometrically isolated hepatic stem/progenitor cells in the murine fetal liver"Cell Transplantation. 9. 697-700 (2000)
• [Publications] 谷口英樹,鈴木淳史: "多能性肝幹細胞の分化・増殖機構の解明"蛋白・核酸・酵素. 45. 256-262 (2000)
• [Publications] 谷口英樹,鈴木淳史: "「臓器置換」から「臓器再生」へ"細胞工学. 19. 869-873 (2000)
• [Publications] 谷口英樹: "肝臓における再生医療の展開"今日の移植. 13. 228-232 (2000)