2000 Fiscal Year Annual Research Report
新しい胃癌の癌抑制遺伝子AML2(PEBP2dC)の解析と遺伝子診断への応用
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12557107
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
阪倉 長平 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (10285257)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
奥田 司 京都府立医科大学, 医学部, 講師 (30291587)
伊藤 嘉明 京都大学, 医学部, 教授 (80004612)
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| Keywords | 胃癌 / AML2 |
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| Research Abstract |
我々は、世界に先駆けてAML2ノックアウトマウスを作製し、その解析をおこなったところ、胃粘膜の高度の過形成を認めた。これまでノックアウトマウスで胃粘膜に表現型の変化が認められるものは極めて珍しく、転写因子であるAML2遺伝子が胃粘膜の発生や分化に重要な役割をはたしており、この遺伝子の異常が胃粘膜の脱分化や異常増殖や癌化に関連する可能性が考えられた。
我々はFISH法とRNAプローブを用いたin situ hybridization法を用いて、胃癌臨床検体40例のAML2遺伝子のコピー数、発現異常の解析を行なった。20%にコピー数の減少、40%に発現低下を認めた。また早期胃癌や腸上皮化生粘膜でのAML2の発現低下を高頻度に認めており、胃癌発生の初期にAML2が関与している可能性が示唆された。またレトロウイルスベクターを用いて胃癌細胞にAML2遺伝子導入を行ったところ約半数の細胞株で増殖抑制効果が認められ、ヌードマウスでの造腫瘍性が消失した。さらにAML2のプロモーター領域を同定し、塩基配列を調べたところCpGアイランドが多数存在することが明らかとなった。そこで胃癌細胞株6種のgenomic DNAをメチル化感受性制限酵素で処理した後にサザンブロットを行ってメチル化の有無を調べたところ、AML2発現低下とプロモーター領域のメチル化に正の相関が認められた。これより発現低下の機序はプロモーター領域メチル化による可能性が高いと考えられた。
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[Publications] Sakakura C., et al.: "Amplification and overexpression of the AIBI nuclear receptor coactivator gene in primary gastric cancers"Int.J.Cancer. 89(3). 217-223 (2000)
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[Publications] Koide K.,Sakokura C, et al.: "An improved rapid procedure for fluorescence in situ hybridization that is applicable to intraoperative cancer cytodiagnosis"Cancer Lett. 158(2). 165-169 (2000)
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[Publications] Nakanish:Y.,Sakakura C, et al.: "Genetic alterations in primary gastric cancers analyzed by conparative genemic hybridization and clinicopathological factors"Hepotogastro enterology. 47(33). 658-662 (2000)
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[Publications] 阪倉長平: "造血器腫瘍アトラス 14章B-5 細胞遺伝学的方法5.CGH法"日本医事新報社 阿部達生 編著. 5 (2000)
