2002 Fiscal Year Annual Research Report

細胞分裂関連因子を発現させるアンチセンスベクターの開発と歯周病治療薬への応用

Research Project

Project/Area Number	12557189
Research Institution	Kyushu Dental College
Principal Investigator	安細敏弘九州歯科大学, 歯学部, 助教授 (80244789)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山岸純一大日本製薬(株), 主任研究員粟野秀慈九州歯科大学, 歯学部, 講師 (20301442) 竹原直道九州歯科大学, 歯学部, 教授 (00038879)
Keywords	FtsZ / 歯周病 / P. gingivalis / 細胞分裂
Research Abstract	我々はこれまでにPorphyromonas gingivalis(以下P. g)のペプチドグリカン合成過程に重要な酵素の一つであるmurC遺伝子の構造と機能を明らかにした。この領域は大腸菌におけるmra領域(murein synthesis cluster a)に相当しており、murC遺伝子の下流に3つのORFが存在し、それぞれが大腸菌のFtsQ、FtsAおよびFtsZに対して高いホモロジー(16%,33%,54%)を示すことがわかった。P. gFtsZは、他菌種FtsZと同様にGTPase活性を有するが、以下の点でユニークな性質を示すことがわかった。すなわち、1)GTPase活性がNa^+やK^+によって活性が阻害されること、2)Mg^<2+>非存在下でも活性を有すること、およびEDTAによって活性が阻害されないことが明らかとなった。また、P. gFtsZのC末端deletion mutantを作製して、大腸菌におけるfilamentationの変化を観察したところ、C末端から177アミノ酸をdeletionしたmutantでは、filamentationがみられなくなることからT281からR329の49アミノ酸残基内にP. gFtsZの機能に重要な領域が存在することが示唆された。そこで細菌由来のFtsZについてアラインメント分析を行ったところ,A320を中心とした10残基からなる保存領域が存在することを見いだし,A-domainと名付けた。site-directed mutagenesis法により作製されたAla320をターゲツトにした2つの点変異株(A320HおよびA320R)では,P. gFtsZタンパクの発現によってfilamentationが観察されず,コントロールと同様の形態を示した。またA-domainのG322の点変異株においても同様の結果であった。これらの結果からP. gFtsZのA1a320とGly322が細胞分裂に重要な役割を有していることが示唆された。A-domainは他の歯周病原因菌においても存在していることから、A-domainを標的にした歯周病治療薬の開発に向けた糸口が得られたと考えている。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Akifusa, S., Ansai, T., et al.: "Characterization of the Porphyromonas gingivalis FtsZ containing a novel GTPase activity"Curr. Microbiol.. 44. 267-272 (2002)
[Publications] Arimoto, T., Ansaai, T., et al.: "kinetic analysis of PPi-dependent phosphofructokinase from Porphyromonas gingivalis"FEMS Microbiol.Lett.. 207. 35-38 (2002)
[Publications] Yu, W., Ansai, T., et al.: "A conserved Ala320 in the FtsZ of Porphyromonas gingivalis is important for cell division"Curr. Microbiol.. 45. 355-361 (2002)
[Publications] Kusaba, A., Ansai, T., et al.: "Cloning and expression of a Porphyromonas gingivalis gene for protoporphyrinogen oxidase by complementation of a hemG mutant of Escherichia coli"Oral Microbiol. Immunol.. 17. 290-295 (2002)
[Publications] Ansai, T., et al.: "Conserved proline residues near the N-terminus are important for enzymatic activity of class A bacterial acid phosphatases"Arch. Biochem. Biophysic.. 408. 144-146 (2002)
[Publications] Kusaba, A., Ansai, T., et al.: "Cloning and sequencing of a hemK-family gene in Porphyromonas gingivalis"DNA seq.. (in press).
[Publications] 安細敏宏(分担執筆): "歯周病最前線-オーラルケアが守る長寿社会のQOL-"日本歯科評論. 354 (2000)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

細胞分裂関連因子を発現させるアンチセンスベクターの開発と歯周病治療薬への応用

Principal Investigator

安細 敏弘 九州歯科大学, 歯学部, 助教授 (80244789)

Research Products

[Publications] Akifusa, S., Ansai, T., et al.: "Characterization of the Porphyromonas gingivalis FtsZ containing a novel GTPase activity"Curr. Microbiol.. 44. 267-272 (2002)

[Publications] Arimoto, T., Ansaai, T., et al.: "kinetic analysis of PPi-dependent phosphofructokinase from Porphyromonas gingivalis"FEMS Microbiol.Lett.. 207. 35-38 (2002)

[Publications] Yu, W., Ansai, T., et al.: "A conserved Ala320 in the FtsZ of Porphyromonas gingivalis is important for cell division"Curr. Microbiol.. 45. 355-361 (2002)

[Publications] Kusaba, A., Ansai, T., et al.: "Cloning and expression of a Porphyromonas gingivalis gene for protoporphyrinogen oxidase by complementation of a hemG mutant of Escherichia coli"Oral Microbiol. Immunol.. 17. 290-295 (2002)

[Publications] Ansai, T., et al.: "Conserved proline residues near the N-terminus are important for enzymatic activity of class A bacterial acid phosphatases"Arch. Biochem. Biophysic.. 408. 144-146 (2002)

[Publications] Kusaba, A., Ansai, T., et al.: "Cloning and sequencing of a hemK-family gene in Porphyromonas gingivalis"DNA seq.. (in press).

[Publications] 安細 敏宏(分担執筆): "歯周病最前線-オーラルケアが守る長寿社会のQOL-"日本歯科評論. 354 (2000)

安細敏弘九州歯科大学, 歯学部, 助教授 (80244789)

[Publications] 安細敏宏(分担執筆): "歯周病最前線-オーラルケアが守る長寿社会のQOL-"日本歯科評論. 354 (2000)