トリチウム水の被曝線量推定のための分子バイオドシメトリー法とモニターマウスの開発

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12558049
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 神谷 研二 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 教授 (60116564)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 隅井 雅晴 広島大学, 医学部, 助手 (60284220) ; 増田 雄司 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (30273866) ; 小松 賢志 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 教授 (80124577) ; 井倉 毅 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (70335686)
• Keywords: 自然突発異変 / Rev1 / 誤りがちなDNA合成 / トリチウム / 遺伝子損傷 / DNA修復 / translesion

Research Abstract

HTOβ線は細胞内に活性ラジカルを生成しこれが遺伝子損傷を誘発する。この損傷修復およびその過程で誘発される突然変異は、自然突然変異が発生する機構と同一と考えられている。この突然変異の発生は、「誤りがちなDNA合成」に関与するumuC遺伝子などにより制御されている。エイムス試験は、この様な遺伝子機能を亢進する事で効率よく突然変異を検出する測定系である。我々は、酵母で同様な機能を担うREV1遺伝子と相同性を有するマウスとヒトのRev 1遺伝子のクローニングに成功し、エイムス試験をマウスで可能にする為、その機能解析を行った。マウスRev1遺伝子を大腸菌で過剰発現させ、組み替えタンパク質を精製した。生化学的解析の結果、マウスRev1遺伝子がコードするタンパク質は損傷乗り越え型DNAポリメラーゼファミリーの一員であり、グアニンやAP部位に対して特異的にdCMPを重合するdCMP転移酵素であることを明らかにした。この事からRev1遺伝子は、「誤りがちなDNA合成」をする事が明らかとなった。HTOβ線に高感度な変異マウスを作成する為に、Rev1トランスジェニックマウスの作成を行った。Rev1遺伝子の発現ベクターを作成し受精卵へ導入した。現在までに導入したRev1遺伝子を持った1匹のマウスを得ることが出来、ノーザン法で各臓器でのその発現を解析中である。

Research Products

• [Publications] Masuda.T., et al.: "Mechanisms of dCMP transferase reactions catalyzed by mouse Rev1 protein"J.Biol.Chem.. 277(4). 3040-3046 (2002)
• [Publications] Nitta, Y., et al.: "age-dependent exposure to radioactive iodine (^<131>I) in he thyroid and total body of newborn, pubertal and adult fischer 344 rats"J.Radiat.Res.. 42(2). 143-155 (2001)
• [Publications] Masuda.Y., et al.: "Deoxycytidyl transferase activity of the human REV1 protein is closely associated with the conserved polymerase domain"J.Biol.Chem.. 276(18). 15051-15058 (2001)
• [Publications] Fukuda.S., et al.: "Murine and human SDF2L1 is an endoplasmic reticulum stress-inducible gene and encodes a new member of the Pmt/rt protein family"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 280(1). 407-414 (2001)
• [Publications] G.Buscemi, et al.: "Chk2 activation dependence on Nbs1 after DNA damage"Mol.Cell.Biol.. 21(15). 5214-5222 (2001)
• [Publications] H.Tauchi, et al.: "The FHA domain of NBS1 is essential for nuclear foci formation after irradiation, but not essential for hRAD50/hMRE11/NBS1 complex DNA repair activity"J.Biol.Chem.. 276(1). 12-15 (2001)
• [Publications] Ubagai, T., et al.: "Comparative genomic hybridization analysis suggests a gain of chromosome 7p associated with lymph node metastasis is non small cell lung cancer"Oncology Reports. 8(1). 83-88 (2001)
• [Publications] 亭島淳, その他: "放射線誘発マウス肝癌におけるIGFBP-7遺伝子の役割"ホルモンと臨床. 49冬季増刊号. 215-220 (2001)