2000 Fiscal Year Annual Research Report
DNA修復遺伝子欠損マウスを用いた変異原性の検出・評価系の開発
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12558063
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
續 輝久 九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (40155429)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
真木 寿治 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 教授 (20199649)
吉村 康秀 九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (60263307)
藏 忍 九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (90037391)
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| Keywords | 活性酸素 / 酸化ストレス / 自然突然変異 / ミューテーター / 8-オキソグアニン / 8-oxo-dGTPase / DNA修復 / 自然発がん |
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| Research Abstract |
電離放射線や環境中に存在する化学物質、さらには生体内での通常の代謝活動によっても活性酸素が生じている。これらは様々な作用を生体にもたらすが、中でもDNAの酸化は突然変異や発がんさらには生体の老化に深く関わっていることが示唆されてきた。種々のDNAの酸化的損傷の中で、グアニン塩基の酸化はその強力な突然変異原性により注目されている。活性酸素に伴うDNA上の損傷と自然突然変異および発がんの関連を明らかにし、その過程を分子レベルで解明することを目的に、標的遺伝子組換えにより樹立したMTH1遺伝子の欠損マウスを用いて解析した。
(1) SPF飼育条件下で1年半を経過した時点でのマウス個体(MTH1^<+/+>,MTH1^<-/->)における自然発がんを検討したところ、肺・胃・肝いずれかの臓器における腫瘍の発生は、MTH1^<-/->マウスにおいて統計学的に有意に上昇していた。
(2) 近交系C57BL6/Jに純化したマウス個体を用いて突然変異を解析した。その結果、生後4週齢並びに24週齢の時点での脾臓においては、野生型とMTH1^<-/->マウス個体との間では、突然変異頻度の顕著な差は認められなかった(やや上昇している程度)。
(3) 突然変異スペクトラムを比較したところ、レポーター遺伝子であるrpsL遺伝子の塩基配列内のアデニンヌクレオチドが連続している部分に野生型マウスでは認められない変異を観察した。
(4) 現在レポーター遺伝子として用いているrpsL遺伝子の塩基配列内に存在するモノ・ヌクレオチドが連続している部分に変異を導入し、新たなタイプの検出系の作製に着手した。
(5) DNA中の8-oxoGに関連したDNA修復酵素OGG1並びにMYHをコードする遺伝子の欠損マウスに関して、近交系への戻し交配による純化を進めている。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Yoshiyama,K. et al.: "Directionality of DNA replication fork movement strongly affects the generation of spontaneous mutations in Escherichia coli."J.Mol.Biol.. (in press). (2001)
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[Publications] Tsuzuki,T. et al.: "Analysis of MTH1 gene function in mice with targeted mutagenesis."Mutat.Res.. (in press). (2001)
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[Publications] Yoshimura,Y. et al.: "Chronic treatment with lithium and valproate increases fosB gene expression in rat cortex."Gene. (in press). (2001)
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[Publications] Liang,R. et al.: "Presence of potential nickel-responsive element (s) in the mouse MTH1 promoter."Annals Clinic. & Lab.Sci.. 31. 91-98 (2001)
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[Publications] Kawate,H. et al.: "A defect in a single allele of the Mlh1 gene causes dissociation of killing and tumorigenic actions of an alkylating carcinogen in methyltransferase-deficient mice."Carcinogenesis. 21. 301-305 (2000)
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[Publications] Bain,G. et al.: "Es cell neural differentiation reveals a substantial number of novel neural ESTs."Func.Integr.Genomics. 1. 127-139 (2000)
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[Publications] Hiraoka,M. et al.: "Spontaneous loss of heterozygosity in diploid Saccharomyces cerevisiae cells."Genetics. 156. 1531-1548 (2000)
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[Publications] Kamiya,H. et al.: "Two DNA polymerases of Escherichia coli display distinct misinsertion specificities for 2-hydroxy-dATP during DNA sunthesis."Biochemistry. 39. 9508-9513 (2000)
