各種日本住血吸虫ワクチン分子の野外試験評価と効果発現の分子的機序の解析

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12576009
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 太田 伸生 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (10143611)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 平山 謙二 長崎大学, 熱研, 教授 (60189868) ; 鈴木 高史 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助手 (70305530) ; 丸山 治彦 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (90229625) ; 奈良 武司 順天堂大学, 医学部, 助手 (40276473)
• Keywords: 日本住血虫 / カルパイン / ワクチン / DNAワクチン / CpGオリゴヌクレオチド / セルカリア / 免疫染色法

Research Abstract

日本住血吸虫カルパインのレコンビナントタンパクを大量精製して単クローン抗体の作製とブタでのワクチントライアルに供した。作製した単クローン抗体を用いた免疫組織化学的検討によりカルパインの住血吸虫での発現を発育過程に応じて追跡した結果、セルカリアの時期に分泌腺を中心に強い発現を認め、カルパインワクチンの効果発現の機序解明を示唆する所見を得た。ブタにおけるワクチン効果を中国側共同研究者と共に実施したがわずかに産卵抑制が観察されたものの感染抑止効果は観察できなかった。その原因を検討するために免疫群の抗体産生を経時的に観察したがマウスの実験で見られた感染によるブースト効果が見られず、ワクチンの投与法に検討の余地のあることが判明した。ブタの感染実験ではパラミオシンやGSTなど他のワクチン抗原が感染によるブースター効果を示すと考えられることからカルパインのワクチン候補分子としての特殊性が示唆された。昨年度に引き続いて検討したカルパインのDNAワクチンは耳部の皮下注射により高い抗体価の上昇を誘導することを確認したが抗体価の上昇と感染防御効果とは有意な相関を示さず、日本住血吸虫の感染防御に細胞性免疫の効果が大きいことが確認できた。CpGオリゴヌクレオチド(CpG ODN)が単独で発症阻止効果を持つことを観察したが、その強いTh1誘導効果をアジュバントとして応用する試みを行なった。マウスの実験ではCpG ODNの併用によって免疫応答がTh1にシフトすることが確認され、さらにCpGの経鼻投与でも同様の効果がみられた。CpG ODNの体内半減期が短いことから身体侵襲の少ない投与法を確立して頻回投与を行なうことも必要と思われた。以上を総括して家畜動物を標的とした日本住血吸虫ワクチンの実用化の方針を日中双方の研究者で確認した。

Research Products

• [Publications] Yoshida A, Maruyama H, Kumagai T, Amano T, Kobayashi F, Kuribayashi K, Ohta: "Enhanced UV ♀1 tumor growth in CBF1 mice infected with Schistosoma mansoni due to modulation of Th1-like responses"Parasitol Int. 51. 177-186 (2002)
• [Publications] Kumagai T, El-Malky M, Maruyam H, Ohta N.: "Effects of CpG oligonucleorides on Schistosoma japonicum infection in mice"Nagoya Med J. (in press).
• [Publications] Itoh M, Ohta N, Kanazawa T, Nakajiam Y, Sho M, Minai M, Zhou D, Chen Y, He H, He Y, Zhong Z: "Sensitive enzyme-linked immunosorbent assay with urine samles : A tool for surveillance of schistosomiasis japonica"Southeast Asian J Trop Med. Pub Health. (in press).
• [Publications] Maruyama H, Hirabayashi Y, El-Malky M, Okamura S, Aoki M, Itagaki T, Nakamura-Uchiyama F, Nawa Y, Shimada S, Ohta N, Nakamura-Uchiyama F, Nawa Y, Shimada S, Ohta N: "Strongyloides venezuelensis : Mucosal sulfated carbohydrates determine the longitudinal distribution of adult worm in the host intestine"Exp Parasitol. 100. 179-185 (2002)
• [Publications] Hirayama K: "Generic factors associated with development of cerebral malaria and fibrotic schistosomiasis"Korean J Parasitol. 40. 165-172 (2002)
• [Publications] 太田伸生: "看護のための最新医学講座第4巻"中山書店. 3 (2002)