2000 Fiscal Year Annual Research Report
ペルオキシソームタンパク質の細胞内輸送を担う新規の因子の同定とその機能解析
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12640625
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| Research Institution | Okazaki National Research Institutes |
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Principal Investigator |
林 誠 岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 助教授 (50212155)
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| Keywords | ペルオキシソーム / グリオキシソーム / タンパク質輸送 / 脂肪酸β酸化 / 光呼吸 / 膜透過 / シロイヌナズナ / 突然変異体 |
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| Research Abstract |
アラビドプシスped2突然変異体は、ペルオキシソームの機能の一つである脂肪酸β酸化系を欠損する。申請者は、この突然変異体を用いることによってペルオキシソームタンパク質の細胞内輸送機構の分子機作が解明できると考えている。本年度は、(1)ped2突然変異体のペルオキシソーム機能、(2)各種ペルオキシソームタンパク質の細胞内輸送状況、(3)PED2遺伝子およびcDNAの同定、(4)遺伝子産物の解析、の4点について検討を加えた。その結果、以下のことが明らかになった。
(1)ped2突然変異体は、脂肪酸β酸化系のみならず、光呼吸活性など、広くペルオキシソーム機能を欠損する。
(2)ペルオキシソームタンパク質には、細胞内輸送機構の異なる2種類のタイプが知られている。ped2突然変異体では、どちらのタイプに属するタンパク質も正しくペルオキシソームへ輸送されず、サイトゾルに蓄積している。
(3)分子遺伝学的解析の結果、PED2遺伝子がP1クローン;MQB2の7.2kb Xho I断片に存在することが判明した。cDNAの同定を行ったところ、この遺伝子には12個のエクソンが存在し、507アミノ酸からなるポリペプチドをコードすると推定された。アミノ酸配列は、ヒトPexl4pと約30%の類似性を持っており、本タンパク質をAtPexl4pと命名した。
(4)AtPexl4pは、75kDのペルオキシソーム膜タンパク質であり、その大半がサイトゾル側を向いている。
以上の結果は、EMBO J.(2000)19,5701-5710.にて発表した。
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Research Products
(10 results)
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[Publications] Hayashi et al.: "AtPexl4p maintains peroxisomal functions by determining protein targeting to three kinds of plant peroxisomes"EMBO J.. 19. 5701-5710 (2000)
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[Publications] Hayashi et al.: "Plant peroxisomes ; molecular basis of the regulation of their functions"J.Plant Res.. 113. 103-109 (2000)
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[Publications] Hayashi et al.: "Functional transformation of plant peroxisomes"Cell Biochem.Biophys.. 32. 295-304 (2000)
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[Publications] De Bellis et al.: "Purification and characterization of a novel pumpkin short-chain acyl-CoA oxidase with structural similarity to acyl-CoA dehydrogenases"Plant Physiol.. 1231. 327-334 (2000)
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[Publications] Takemoto et al.: "Isolation of the gene for EILP, an elicitor-inducible LRR receptor-like protein, from tobacco by differential display"Plant Cell Physol... 41. 458-464 (2000)
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[Publications] Nito et al.: "Pumpkin peroxisomal ascorbate peroxidase is localized on peroxisomal membranes and unknown membranous structures"Plant Cell Physiol.. 42. 20-27 (2001)
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[Publications] Kato et al.: "Transport of peroxisomal proteins that are synthesized as large precursors in plants"Cell Biochem.Biophys.. 32. 269-275 (2000)
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[Publications] Mane et al.: "A leaf-peroxisomal protein, hydroxypyruvate reductase, is produced by light-regulated alternative splicing"Cell Biochem.Biophys.. 32. 147-154 (2000)
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[Publications] 林誠: "GFPを用いてタンパク質の動きや輸送を見る"化学と生物. 38. 386-389 (2000)
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[Publications] 林誠: "高等植物ペルオキシソームに秘められた未知なる機能"化学と生物. 38. 602-603 (2000)
