2000 Fiscal Year Annual Research Report
鳥類の脳内浸透圧受容体と下垂体神経葉ホルモンの分泌調節機構
Project/Area Number |
12660253
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Research Institution | Nagoya University |
Principal Investigator |
齋藤 昇 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 助教授 (40211924)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
島田 清司 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 教授 (40065579)
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Keywords | ニワトリ / 浸透圧 / クローニング / アクアポリン / 塩基配列 |
Research Abstract |
哺乳類において、アクアポリンは水チャンネルとして同定され、腎臓などにおいて機能の研究が進んでいる。このアクアポリンのサブタイプであるアクアポリン4(AQP4)は、脳内に存在し水分のセンサーとして調節に関与しているのではないかと考えられている。鳥類においては、アクアポリンの研究は進んでおらず何も報告がされていない。本研究では、ニワトリの脳のAQP4をクローニングし、その局在性を明らかにし、AQP4が浸透圧受容体であるかどうかを明らかにしようとするものである。 哺乳類などのクローニングされた塩基配列から、プライマーを設計する。そして、ニワトリの視床下部から抽出したRNAを逆転写しDNAにしたのち、哺乳類から決めたプライマーを用いてPCRを行い、PCRサンプルを電気泳動し一つのバンドが確認し、プラスミッドにサブクローンし、塩基配列を調べた。この塩基配列が、相同性などから哺乳類のAQP4と非常に相同性が高いものであることであることから、この遺伝子断片はニワトリのAQP4であることが示唆された。今後、AQP4であるならば3'-RACEあるいは5'-RACEの方法を用いてAQP4の塩基配列の全長を決定し、また浸透圧などの生理的条件を変化させた場合の遺伝子発現を調べる予定である。
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[Publications] Suzuki T,Kurosaki T,Agata T,Koide M,Shimada K.Kansaku N.Koide M,....: "Cytogenetical assignment of 29 functional genes on chicken microchromosomes by FISH."Cytogenetics Cell Genetics. 87. 232-237 (2000)
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[Publications] Mao X.,Zhang C.,Saito N.,Shimada K.: "Expression of messenger ribinucleic acids of luteinizing hormone and follicle-stimulating hormone receptors in the embryonic and posthatch gonads of the chicken."Japanese Poultry Science. 37. 212-220 (2000)
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[Publications] Nishikimi H.,Kansaku N.,Saito N.,Usami M.,Ohno Y.and Shimada K.: "Sex differentiation and mRNA expression of P450c17,P450arom and AMH in gonads of the chicken."Molecular Reproduction and Development. 55. 20-30 (2000)
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[Publications] Sasaki T.,Arakawa K.,Shimada K.and Saito N.: "The effects of highly selective opioid receptor antagonists on the release of arginine vasotocin induced by hyperosmotic stimulation and angiotensin II injeciton."General and Comparative Endocrinology. 118. 365-372 (2000)
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[Publications] Sasaki T.,Shimada K.and Saito N.: "Regulation of opioid peptides on the release of arginine vasotocin in the hen."Journal of Experimental Zoology. 286. 481-486 (2000)
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[Publications] Ieda T.,Takahashi T.,Saito N.,Yasuoka T.,Kawashima M.,and Shimada K.: "Changes in parathyroid hormone related peptide receptor binding in the shell gland of laying hens (Gallus domesticus) during the oviposition cycle."General and Comparative Endocrinology. 117. 182-188 (2000)
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[Publications] Tan FI,Lolait SJ,Brownstein MJ,Saito N,MacLeod V,Baeyens DA,Mayeaux PR,....: "Molecular cloning and functional characterization of a vasotocin receptor subtype that is expressed in the shell gland and brain of the domestic chicken."Biology of Reproduction. 62. 8-15 (2000)
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[Publications] Saito N.,Sasaki T.,Furuse M.,Arakawa K.and Shimada K.: "Effects of AVT antisense oliodeoxynucleotides on AVT release induced by hypertonic stimulation in chicks."Comparative Biochemistry and Physiology. 128A. 147-153 (2001)