線毛発生における機能分子の解明とその特性についての研究

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12670005
• Research Institution: Gunma University
• Principal Investigator: 萩原 治夫 群馬大学, 医学部, 助教授 (80189464)
• Keywords: 線毛発生 / 線毛細胞 / 線毛 / 中心子 / 根小毛 / 免疫組織化学 / 免疫電顕

Research Abstract

(1)線毛を伸長した基底小体には、striated rootlet,basal foot,transitional fiberなどの付属構造が付随している。Striated rootletの205/215kDaの蛋白を認識する6個のラットモノクロナル抗体を作製して、その局在について免疫組織化学的に様々な組織を用いて検討した。ヒト卵管分泌細胞の孤立線毛に付随するrootletは、分枝、ループ状、星型等の多様な形態を示した。Rootletの長さは3.83nmで、閉経後は3.53nmに有意に短くなった(P=0.038)。作製したモノクロナル抗体とヒト肺cDNAライブラリーを用いて、抗体の認識する蛋白質をコードしているcDNAのスクリーニングを行って44個の陽性クローンを獲得し、現在DNAシークエンスについて解析している。
(2)線毛と孤立線毛の付属構造におけるgamma-tubulinの局在について免疫組織化学的に解析した。基底小体の側方から伸びでているbasal footにgamma-tubulinが局在していることをはじめて超微形態レベルで証明した。
(3)孤立線毛を伸長した基底小体と、それと対をなす中心子との間に、striated connectorを見出し、電顕、免疫電顕的に解析した。Striated connectorの横紋の周期は54nmで、striated rootletと比較して15nm短かったが、免疫電顕により、両者が共通の蛋白分子から構成されていることを明らかにした。
(4)線毛の形成に関わらず、中心子にrootletが付随していることを組織化学的に証明した。細胞周期のG2/M期において、中心子が移動する際のrootletの形態変化について解析した。

Research Products

• [Publications] Hagiwara H. et al.: "Localization of gamma-tubulin to the basal foot associated with the basal body extending a cilium."The Histochemical Journal. 32. 669-671 (2000)
• [Publications] Hagiwara H. et al.: "Ciliogenesis and ciliary abnormalities."Medical Elecron Microscopy. 33. 109-114 (2000)
• [Publications] Hagiwara H. et al.: "Immunocytochemistry of the striated rootlets associated with solitary cilia in human oviductal secretory cells."Histochemistry and Cell Biology. 114. 205-212 (2000)