ヒト補体レクチン経路のMASP-1およびMASP-2遺伝子の発現調節機構

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12670119
• Research Institution: Fukushima Medical University School of Medicine
• Principal Investigator: 遠藤 雄一 福島県立医科大学, 医学部, 助教授 (20117427)
• Keywords: 補体レクチン経路 / MASP遺伝子 / C1s遺伝子 / プロモータ / セリンプロテアーゼ

Research Abstract

補体レクチン経路を惹起するセリンプロテアーゼ、MASP-1およびMASP-2遺伝子の発現調節機構の解明を目的として、両遺伝子のプロモータを解析した。また、補体古典的経路を惹起するC1s遺伝子のプロモータと比較した。
1 ヒトMASP-1,MASP-2,C1s遺伝子の上流領域を単離し、転写開始点と上流領域の塩基配列を決定した。
2 各遺伝子の上流領域2〜3KbpをpGL3ベクターに連結し、HepG2細胞またはHeLa細胞に導入しプロモータ活性を測定した。その結果、正常向きのコンストラクトは逆向きと比較し50〜100倍高い活性を示した。また、HepG2細胞を宿主とした場合、HeLa細胞と比較し150〜400倍高い活性が得られた。さらに、種々の欠失変異体を作成し、発現調節に働くシスエレメントを同定した。
3 pGL3ベクターを導入したHepG2細胞にIL-6,IL-1βあるいはIFN-γを添加し、プロモータ活性に及ぼす効果を測定した。その結果、IL-1βはMASP-1およびMASP-2の活性を30〜80%増加させた。IL-1βの効果はIL-6の共存によって消失した。一方、C1sプロモータの活性は、IL-6,IL-1βの添加によって約2倍に増加し、両者の共存によって4倍に増加した。IFN-γは、MASP-2には影響しなかったが、MASP-1を阻害しC1sの活性を約3倍増加させた。これらサイトカインの効果から、C1sは典型的な急性期タンパクであることが示唆された。一方、二つのMASPにはその特徴は見られず、それぞれが関与する補体活性化経路の生理的意味のちがいを示していると考えられた。とくに、IL-6とIFN-γはMASP-1とC1sに及ぼすその対照的な効果から、2つの補体活性化経路の相互転換に関与している可能性が示唆された。

Research Products

• [Publications] Sekine H.: "An ancient lectin-dependent complement system in an ascidian : novel lectin isolated from the plasm of the solitary ascidian, Halocynthia roretzi"J. Immunol. 167. 4504-4510 (2001)
• [Publications] Stover C.: "The human gene for mannan binding lectin-associated serine protease-2 (MASP-2), the effector component of the lectin route of complement activation"Genes Immun.. 2. 119-127 (2001)
• [Publications] Kenjo A.: "Cloning and characterization of novel ficolins from solitary ascidian, Halocynthia roretzi"J. Biol. Chem.. 276. 19959-19965 (2001)
• [Publications] Ariga H.: "A correlation between Try290Cys in the FGFR2 gene and phenotype of Pfeiffer syndrome type 2"Pediatr. Int.. 43. 293-295 (2001)
• [Publications] Nakagawa M.: "Polymorphic expression of decay-accellerating factor in human colorectal cancer"J. Gastoenterol Hepatol.. 16. 184-189 (2001)
• [Publications] Watabe K.: "Structure, expression and chromosome mapping of MLZE, a novel gene which is preferentially expressed in metastatic"Jpn. J. Cancer Res.. 92. 140-151 (2001)