ノックアウトマウスを用いたATF2遺伝子ファミリーの機能解析

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12670126
• Research Institution: The Institute of Physical and Chemical Research
• Principal Investigator: 前川 利男 理化学研究所, 分子遺伝学研究室, 副主任研究員 (90201764)
• Keywords: 転写因子 / ATF-2 / 乳癌 / Gadd45 / APC / c-jun / アニソマイシン / ノックアウトマウス

Research Abstract

これまで私達はJNKやp38で活性化される転写因子ATF-2ファミリーメンバーのin vivoでの生理的な役割を理解するために、それぞれの欠損マウスを作製してきた。
1,ATF-2遺伝子ヘテロ欠損マウスは雌で生後一年以上経過すると高頻度で(18例/31匹)乳癌の発症が見られた。この乳癌はスキルス硬癌と診断され、肺や肝臓への転位を伴うものであった。
2、乳癌発症のメカニズムを探るために野生型及びヘテロ、ホモ欠損胎児から初代培養細胞を採取しチップテクノロジー法を用いて発現している遺伝子を比較したところAPCとc-junの発現が変異細胞で低下していた。
3、3T3法で樹立した細胞株を用いて2と同様に解析したところ、新たにGadd45遺伝子の発現誘導がATF-2欠損細胞で著しく低下することが明らかになった。特にアニソマイシンによるシグナル伝達系が阻害されていた。
4、正常乳腺ではGadd45遺伝子の発現が見られたが、乳癌組織ではいずれも著しく発現が低下していた。
5、また野生型及びヘテロ、ホモ欠損胎児から初代培養細胞を採取し活性型RASを発現させた後、ヌードマウスに移植した結果、ヘテロとホモの場合は100%腫瘍を形成したが、野生型では全く形成されなかった。
6、以上の事からATF-2ヘテロ欠損マウスは腫瘍になるポテンシャルが非常に高く、生後1年程度の間に新たな変異が導入されるとβ-カテニンの蓄積やGadd45の誘導不全等により、腫瘍を発症すると考えられる。

Research Products

• [Publications] Tanaka Y, Naruse I, Hongo T, Xu M, Nakahata T, Maekawa T, Ishii S: "Extensive brain hemorrhage and embryonic lethality in a mouse null mutant of CREB-binding protein."Mech Dev.. 95. 133-145 (2000)
• [Publications] Shinagawa T, Dong HD, Xu M, Maekawa T, Ishii S: "The sno gene, which encodes a component of the histone deacetylase complex, acts as a tumor suppressor in mice."EMBO J.. 15. 2280-2291 (2000)