2001 Fiscal Year Annual Research Report

マウス破骨細胞分化因子(RANKL)遺伝子プロモータ領域の解析

Research Project

Project/Area Number	12670204
Research Institution	KOBE UNIVERSITY
Principal Investigator	北澤理子神戸大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (00273780)
Keywords	破骨細胞 / RANKL / 遺伝子プロモータ / ビタミンD_3 / メチル化シトシン
Research Abstract	骨芽細胞は、1)骨髄造血系細胞の増殖に必要なM-CSFなど液性因子の供給、2)破骨細胞への最終分化に不可欠な破骨細胞分化因子(RANKL)の発現を介して破骨細胞形成を支持する。私どもはマウスRANKL遺伝子5'上流プロモータ領域を解析し、機能的に有効なVDRE(-937/-922)の解析に加えて、グルココルチコイドの作用に着目して、マウスRANKL遺伝子プロモータ領域のputativeなグルココルチコイド応答配列(-642/-628)について、mutationを導入したconstructを作成して転写活性を検討した。さらに、プロモータ領域に存在するCpG islandのメチル化が遺伝子発現制御に関与することを示した。マウス培養ストローマ細胞ST2は継代数に依存して破骨細胞形成支持能とRANKL発現が低下する。この際、RANKL遺伝子高発現のPassage9(P9)に比してRANKL発現が低いP16では、外因性に導入したRANKL promoter constructの転写活性にはP6と差異を示さないが、遺伝子転写開始部位周辺のCpGが高率にメチル化修飾を受けていることを示した。悪性腫瘍骨転移巣におけるRANKL発現を検索するために、マウスおよびヒトRANKL遺伝子に対する高感度・特異的なプローブを作成してin situ hybridization法を行い、局所のRANKL mRNAを検出した。以上の成果は、英文誌に投稿した(BBRC, Histochem Cell Biol, J Pathol)。また、成果の一部は第90回日本病理学会総会、第19回日本骨代謝学会、第23回米国骨代謝学会議にて報告した。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Tamada H et al.: "Methylation of CpG island of human bone morphogenetic protein-6 gene promoter alters its steady-state expression in prostatic lesion"J Bone Miner Res. 16・3. 487-496 (2001)
[Publications] Sakamoto Y et al.: "Methylation of CpG loci in 5'-flanking region alters steady-state expression of adenomatous polyposis gene in colon cancer cell line"80・3. 415-423 (2001)
[Publications] Kitazawa R et al.: "Gene expression during fracture healing in normal mouse : in situ hybridization on hard tissues for investigation of regenerative mechanism"Acta Histochem Cytochem. 34・5. 321-328 (2001)
[Publications] Kitazawa R et al.: "Vitamin D3 auguments osteoclastogenesis via Vitamin D-responsive element of mouse RANKL gene promoter"BBRC. 290・2. 650-655 (2002)
[Publications] Mon H et al.: "RANK ligand, RANK and OPG expression in type II collagen-induced arthritis mouse"Histochem Cell Biol. (印刷中). (2002)
[Publications] Kitazawa R et al.: "Expression of parathyroid hormone-related protein (PTHrP) in parathyroid tissues of normal and pathological conditions"Histol Histopathol. 17・1. 179-184 (2002)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

マウス破骨細胞分化因子(RANKL)遺伝子プロモータ領域の解析

Principal Investigator

北澤 理子 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (00273780)

Research Products

[Publications] Tamada H et al.: "Methylation of CpG island of human bone morphogenetic protein-6 gene promoter alters its steady-state expression in prostatic lesion"J Bone Miner Res. 16・3. 487-496 (2001)

[Publications] Sakamoto Y et al.: "Methylation of CpG loci in 5'-flanking region alters steady-state expression of adenomatous polyposis gene in colon cancer cell line"80・3. 415-423 (2001)

[Publications] Kitazawa R et al.: "Gene expression during fracture healing in normal mouse : in situ hybridization on hard tissues for investigation of regenerative mechanism"Acta Histochem Cytochem. 34・5. 321-328 (2001)

[Publications] Kitazawa R et al.: "Vitamin D3 auguments osteoclastogenesis via Vitamin D-responsive element of mouse RANKL gene promoter"BBRC. 290・2. 650-655 (2002)

[Publications] Mon H et al.: "RANK ligand, RANK and OPG expression in type II collagen-induced arthritis mouse"Histochem Cell Biol. (印刷中). (2002)

[Publications] Kitazawa R et al.: "Expression of parathyroid hormone-related protein (PTHrP) in parathyroid tissues of normal and pathological conditions"Histol Histopathol. 17・1. 179-184 (2002)

北澤理子神戸大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (00273780)