2000 Fiscal Year Annual Research Report
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12670264
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
井上 松久 北里大学, 医学部, 教授 (10008336)
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| Keywords | グラム陰性桿菌 / Class C型β-ラクタマーゼ / ampR変異 |
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| Research Abstract |
グラム陰性桿菌は、その染色体性にセフェム薬耐性に関わる誘導型class C型酵素の構造遺伝子ampCを保有し、AmpCはDNA結合蛋白の構造遺伝子ampRによって制御されている。このAmpRは、DNA結合蛋白質であり、微量のβ-ラクタム薬で細菌を処理すると細胞壁断片によって活性化され、AmpCを多量に産生すると言われている.そこで本年度は、(1)AmpR活性化はclass C型酵素産生に必須か否かampR変異株を用いて検討する、(2)仮に天然にampR-ampC保有のプラスミドが分離されるとそれは如何なる変異株か、(3)β-ラクタム薬で処理によるシグナルは何かを解析するため、先ずシグナル伝達変異株として既に分離したampG点変異株を用いてその復帰株での酵素活性を検討する、(4)PBPとclass C産生の関わりを調べるため、PCR法によるPBP2,PBP3の増幅primerの設定、の4点を検討した。その結果、(1)では、ampRのある変異株はclass C型酵素を構成的に産生し(発表)、しかもampG欠損株でも酵素量は十分量産生する(投稿準備中)。(2)は、天然からampR-ampC保有プラスミドは、そのDNA塩基配列の結果、ampRに変異およびampCプロモータ部位に変異が認められた。これにampR野生株を共存させると酵素活性が低下した。よって、ampR変異によって自然界からampR-ampCプラスミドが検出される可能性が示された(投稿準備中)。(3)ampG復帰変異株の中に、種々の酵素量変異株分離されたことから、ampGの活性部位のDNA塩基配列を中心に検討を始めている。(4)PBP2,3に関するprimerの設定が解決したことから、E.cloacaeから分離したPBP2,3変異株のDNA塩基配列の検討を始めている。
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[Publications] A..KUGA et al.: "ampR gene mutation that greatly increased class C β-lactamase activity in E.cloacae.."Antimicrob Agents Chemother. 44. 561-567 (2000)
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[Publications] H.YANO et al.: "Pulse-field gel electrophoresis analysis of nosopharynel flora in children attending a day care centen."J Clin Microbiolr. 38. 625-629 (2000)
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[Publications] H.YANO et al.: "A plasmid-encoded metallo-β-lactamase (IPM-6) that confer expanded-spectrum carbapenem resistance."Antimicrob Agents Chemother. 45. (2001)
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[Publications] M.Matsuoka, et al.: "A new macrolide resistant gene ermF that encoded by plasmid in Staphylococcus aureus."Antimicrob Agents Chemther. 45. (2001)
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[Publications] K.Ubukata et al.: "Association of amino acid substitutions in penicillin-binding protein 3 with β-lactam resistance in β-lactamase negative ampicillin-resistant H.influenzae."Antimicrob Agents Chemother. 45. (2001)
