HTLV-1・Taxによるインターフェロン応答遺伝子の活性化機構

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12670286
• Research Institution: Kansai Medical University
• Principal Investigator: 藤澤 順一 関西医科大学, 医学部, 教授 (40181341)
• Keywords: HTLV-1 / Tax / NF-κB / インターフェロン / インターフェロン応答遺伝子 / IFN-β

Research Abstract

HTLV-1TaxでトランスフォームしたRat-1細胞において活性化を受ける細胞遺伝子を8種類同定したところ、そのうち少なくとも4種類はインターフェロン応答遺伝子であった。また、Tax変異体およびNF-κBの発現実験から、これらの遺伝子の活性化は全てNF-κB経路依存的であることが示された。
さらに、Tax発現Rat-1細胞はウイルス(VSV)感染に対して抵抗性を示したため、活性化を受けていた遺伝子の一つで、抗ウイルス活性に関与する2′-5′オリゴアデニル酸合成酵素遺伝子の転写調節領域をルシフェラーゼアッセイを用いて解析し、そのインターフェロン応答配列がTaxおよびNF-κBの発現により活性化されることを明らかにした。
そこで、Tax発現Rat-1細胞の培養上清中のインターフェロン活性を測定したところ、有意な量のインターフェロン活性が検出された。インターフェロン分子種を特定するため、転写調節領域にNF-κBを持つことが知られるβ-インターフェロン遺伝子の発現をRT-PCR法で検討したところTaxによる活性化が観察され、また、培養上清中のインターフェロン活性は抗ラットβ-インターフェロン抗体により中和された。
次に、ATL患者末梢血における2′-5′オリゴアデニル酸合成酵素遺伝子およびヒトβ-インターフェロン遺伝子の発現をRT-PCR法で解析したところ、ATL細胞ではいずれの遺伝子も発現の活性化が観察された。これらの事実および、T細胞の分化に関与することが示されているschlafen-4遺伝子がRat-1細胞においてTaxおよびインターフェロンによって活性化されることから、ATLをはじめとするHTLV-1関連疾患の発症過程におけるβ-インターフェロン発現の機能的関与に興味が持たれた。

Research Products

• [Publications] Matsuzaki,K. et al.: "Autocrine stimulatory mechanism by transforming growth factor in Human Hepatocellular Carcinoma."Cancer Research. 60(5). 1394-1402 (2000)
• [Publications] Kimura,T. et al.: "Rev-dependent association of the intron-containing HIV-1 gag mRNA with the nuclear actin bundles and the inhibition of its nucleocytoplasmic transport by latrunculin-B."Genes to Cells. 5(4). 289-307 (2000)
• [Publications] Okada,Y. et al.: "Transcriptional activation of JC virus by human T-lymphotropic virus type I Tax protein in human neuronal cell lines."J.Biol.Chem.. 275(22). 17016-17023 (2000)
• [Publications] Matsuzaki,K. et al.: "Regulatory mechanisms for transforming growth factor as an autocrine inhibitor in human hepatocellular carcinoma : Implications for roles of Smads in its growth."Hepatology. 32(2). 218-227 (2000)