2000 Fiscal Year Annual Research Report
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12670295
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
鍔田 武志 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (80197756)
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| Keywords | CD40 / Bリンパ球 / 転写因子 / NF-κB / プロモーター / p27^<Kip> / 細胞周期 / 標的遺伝子 |
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| Research Abstract |
CD40シグナルは免疫系において重要な役割を果たす。CD40を介する種々のシグナル伝達分子の活性化については明らかになっているが、これらのシグナル分子がどのようにして標的遺伝子の転写制御を行うのかについては不明の点が多い。我々は、CD40シグナルにより、細胞周期阻害因子p27^<Kip1>のmRNAレベルでの発現がBリンパ球で低下し、この発現低下がBリンパ球の増殖の誘導に関与することを明らかにしている。そこで、CD40シグナルがp27^<Kip1>の転写を抑制する機構について解析した。CD40シグナルは転写因子NF-κBを活性化することが知られているので、Balb3T3細胞を用いてp27^<Kip1>のプロモーター活性に対するNF-κBの影響をルシフェラーゼアッセイにより検索した。RelA発現プラスミドのトランスフェクションによりコントロールに用いたNF-κB反応性プロモーターの活性は著明に誘導されたが、p27^<Kip1>の約3kbのプロモーター領域の活性は著明に減弱した。さらに、RelA発現プラスミドと共にIκBのドミナントアクティブフォームの発現プラスミドを導入してNF-κBの活性を阻害すると、p27^<Kip1>の発現低下がおこらなくなった。この結果は、CD40シグナルによるp27^<Kip1>の発現低下にNF-κBが関与することを強く示唆する。
次いで、p27^<Kip1>のプロモーター領域の種々の欠失ミュータントを作成することにより、NF-κBの活性化により阻害されるp27^<Kip1>のプロモーター領域の同定を行った。その結果、-581と-348の約250bpの領域にNF-κEの活性化に反応して、プロモーター活性を低下させる領域があることが明らかとなった。この領域にはNF-κB結合配列があることから、NF-κBがこの配列に結合してp27^<Kip1>の転写を阻害する事が示唆さ
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Tsubata T: "CD72 negatively regulates signaling through the antigen receptor of B cells"J.Immunol.. 164. 1223-1229 (2000)
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[Publications] Tsubata T: "B cell tolerance and autoimmunity"Rev.Immunogenet.. 2. 18-25 (2000)
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[Publications] Tsubata T: "Rapid B cell apoptosis induced by antigen receptor ligation does not require Fas (CD95/APO-1),the adapter protein FADD/MORT1 or CrmA-sensitive caspases but is defective in both MRL-+/+ and MRL-lpr/lpr mice"Int.Immunol.. 12. 517-526 (2000)
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[Publications] Tsubata T: "Ras mediates effect or pathways responsible for pre-B cell survival,which is essential for the developmental progression to the late pre-B cell stage"J.Exp.Med.. 191. 2113-2120 (2000)
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[Publications] Tsubata T: "Immunoglobulin-like Receptors(in press)"Sprnger-Verlag Tokyo. (2001)
