未分化幹細胞から肝細胞系への分化誘導因子の同定・クローニング

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12670497
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 遠城寺 宗近 九州大学, 医学部・附属病院, 助手 (20253411)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中牟田 誠 九州大学, 医学部・附属病院, 助手 (00294918)
• Keywords: 幹細胞 / 肝細胞 / 分化因子 / differential gene display

Research Abstract

Liver stem cell様特性を有する細胞株ETK-1,そのETK-1に対して5-azacytidineにて分化誘導中の細胞,さらに分化が完了した細胞株MEKを用いて,differential gene display法にて,その発現パターンから肝細胞への分化因子として可能性のあるbandをpick upした.全体で59のbandを切り出し,その各々についてdirect sequence法にて遺伝子配列を決定した.その中からprotein phosphatase 2AのB subunitの種であるB56δ,他種のprotein phosphataseのsubunitであるcalcineurin B,さらに新規の遺伝子,以上3遺伝子を構造上分化誘導因子の働きが可能な遺伝子と考え,以後の実験に用いることとした.
今後,これら遺伝子の発現の有無,発現パターンを,分化段階の異なる細胞においてノーザンブロット法などで確認する。さらに,これら遺伝子を発現ベクターに導入し,ETK-1細胞等の未分化細胞にて発現させ,形態,増殖能,遺伝子発現パターン,発現タンパクなどの変化を調べ,これらが分化に関与しているかどうか確認していく予定である.

Research Products

• [Publications] Uchimura K. et al.: "Activation of retinoic X receptor and peroxisome proliferator-activated receptor-γ inhibits nitric oxide and tumor necrosis factor α production in rat Kupffer cells"Hepatology. 33. 91-99 (2001)
• [Publications] Noguchi K. et al.: "Expression of a tumor-associated antigen RCAS1 in hepatocellular carcinoma"Cancer Lett.. 168. 197-202 (2001)
• [Publications] Tada S.et al.: "Pirfenidone inhibits dimethylnitrosamine-induced hepatic fibrosis in rat"Clin. Exp. Pharmacol. Physiol.. 28. 522-527 (2001)
• [Publications] Nakamuta M. et al.: "Dimethyl sulfoxide inhibits dimethylnitrosamine-induced hepatic fibrosis in rats"Int. J. Mol. Med.. 8. 553-560 (2001)
• [Publications] Enjoji M. et al.: "Protein phosphatase 2A may participates in hepatocytic differentiation"In Vitro Cell. Develop. Biol. Animal. (in press).