2000 Fiscal Year Annual Research Report
サーファタタント蛋白のRT-PCRによる微小肺癌検出と治療への応用
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12670567
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
安部 庄作 札幌医科大学, 医学部, 教授 (60113510)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
平澤 路生 札幌医科大学, 医学部, 助手 (90264530)
高橋 弘毅 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (60231396)
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| Keywords | 微小転移 / サーファクタントアポ蛋白 / clara cell 10kd protein / 肺癌 / PCR / 免疫染色 / サイトケラチン |
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| Research Abstract |
1.骨髄中のサーファクタントアポ蛋白A(SP-A)をマーカーとした肺癌微小転移の検出法の検討
SP-Aをマーカーとした肺癌微小転移の検出法の有用性を検討するため、報告してきたサイトケラチン(CK)18をマーカーとした検査法と比較検討を行った。対象は切除術が行われた原発性肺腺癌患者30例ある。免疫染色ではCK-18陽性細胞は12例(40.0%)で認められ、SP-A陽性細胞は8例(26.7%)で認められた。原発巣組織でSP-Aの免疫染色は19例(63%)陽性で、それら症例では、骨髄液中SP-A陽性細胞は8例(42.1%)認められ、CKとほぼ同頻度で検出できた。さらにPCR法によるSP-A mRNA検出法では、免疫染色で原発巣のSP-Aが陰性な症例からも陽性例がみられ、免疫染色より高感度であることが示された。骨髄液でのCK18免疫染色とSP-A免疫染色およびPCRには有意な正の相関が認められ有用性が示された。
2.末梢血での肺癌微小転移の検出法の検討
末梢血の肺癌微小転移を検出するため、肺に特異的に発現するSP-A、SP-C、Clara cell 10kdprotein(CC-10)をマーカーとしてPCRを行った。健常人末梢血有核細胞5×10^6に、肺癌細胞を混入させPCRを行った結果、。5×10^6に1個の肺癌細胞でも検出可能であることが示された。健常者や肺癌以外肺疾患患者の末梢血では、間質性肺炎を除けば、陽性は肺化膿症1例のみSP-AmRNAが認められた。非小細胞肺癌患者72例の末梢血からSP-A mRNAが36%、SP-C mRNAが14%、CC-10 mRNAが3%検出された。SP-A mRNAは1期から高頻度に認められたが、SP-C mRNAはIII期以上の進行例に限られた。末梢血中の微小肺癌転移をSP-A、SP-CのRT-PCRにより検出できた。
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[Publications] Takahashi H, et al.: "Serum surfactant proteins A and D as prognostic factors in idiopathic pulmonary fibrosi and their relationship to disease extent."Am J Respir Crit Care Med.. 162(3). 1109-1114 (2000)
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[Publications] Imada A, et al.: "Mast cells correlate with angiogenesis and poor outcome in stage I lung adenocarcinoma."Eur Respir J. 15167. 1087-1093 (2000)
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[Publications] Murakami M, et al: "The mechanisms by which surfactant protein A and D appear in the bloodstream and the intra-alveolar space are different between idiopathic pulmonary fibrosis and pulmonary alveolar proteinosis."Airway Secetion Res. 2. 57-64 (2000)
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[Publications] 黒木由夫 他: "肺サーファクタント"SRL宝函. 23. 228-233 (2000)
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[Publications] 高橋弘毅 他: "末梢気道肺傷害におけるSP-Aの変動と病態との関係"気管支学. 22(8). 657-663 (2000)
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[Publications] Takezawa C, et al: "Surfactant protein A gene and protein expression in cancer cell from pleural effusions of patients with lung adenocarcinomas."Airway Secretion Res. 1. 61-67 (1999)
