キラーT細胞により認識される肺癌拒絶抗原遺伝子の同定と癌ワクチンの開発

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12670583
• Research Institution: Kurume University
• Principal Investigator: 山田 亮 久留米大学, 医学部, 助教授 (50158177)
• Keywords: 肺癌 / 癌免疫療法 / 癌抗原 / 癌ワクチン / ペプチドワクチン / 細胞障害性T / 腫瘍免疫

Research Abstract

肺癌細胞株11-18より作製したcDNAライブラリーよりHLA-A2402拘束性CTL株GK-CTLを用いてgene expression cloning法によりHLA-A24拘束性肺腺癌拒絶抗原遺伝子のクローニングを行い、7個の遺伝子クローンを得た。これらのクローンについてHLA-A2402拘束性が確認されたので、全塩基配列を決定した。その結果、3個は既知の遺伝子であり、4個は新規遺伝子であった。さらに、Northern blottingによりメッセージサイズを決定した。これら7個の遺伝子のうちの一つ、抗癌剤に対する多剤耐性(MDR)に関連したタンパクであるmultidrug resistance associated protein 3(MRP3)をコードする遺伝子については前年度に癌抗原ペプチドの同定を行った。そこで、本年度は他の遺伝子について詳細な検討を加えた。HLA-A24結合性ペプチドのモチーフはすでに決定されているので、HLA-A24結合モチーフを有する9ないし10アミノ酸からなるペプチドを選別し、これらの合成ペプチドをHLA-A2402安定形質転換細胞株C1R-A2402にパルスし、GK-CTLとの反応性をIFN-γ産生で検討した。その結果6個の遺伝子由来の計13個のHLA-A24拘束性癌拒絶抗原ペプチドを同定した。さらに、これらのペプチドによるHLA-A24陽性の健常人もしくは肺癌患者末梢血リンパ球からのペプチド特異的CTLの誘導を試みた。その結果、肺癌患者の末梢血からHLA-A24拘束性ペプチド特異的CTLが誘導され、細胞傷害活性も確認された。これら遺伝子の各種癌細胞におけるmRNA発現を調べたところ、肺癌細胞株全例(n=10)に発現が認められ、癌組織においても発現が確認された。

Research Products

• [Publications] N.Harashima, K.Tanaka, T.Sasadomi, K.Shimizu, Y.Miyagi, A.Yamada, M.Tamura, H.Yamana, K.Itoh, S.Shichijo: "Recognition of the Lck tyrosine kinase as a tumor antigen by cytotoxic T lymphocytes of metastatic cancer patients"Eur.J.Immunol.. 31. 323-332 (2001)
• [Publications] N.Tsuda, K.Murayama, H.Ishida, K.Matsunaga, S.Komiya, K.Itoh, A.Yamada.: "Expression of a newly defined tumor-rejection antigen SART3 in musculoskeletal tumors and induction of HLA class I-restricted cytotoxic T lymphocytes by SART3-derived peptides"Orthopaed.Res.. 19. 346-351 (2001)
• [Publications] K.Harada, A.Yamada, D.Yang, K.Itoh, S.Shichijo.: "Binding of a SART3 tumor-rejection antigen to a pre-mRNA splicing factor RNPS1 : a possible regulation of splicing by the complex formation"Int.J.Cancer. 93. 623-628 (2001)
• [Publications] A.Yamada, K.Kawano, M.Koga, T.Matsumoto, K.Itoh.: "Multidrug resistance-associated protein 3 (MRP3) is a tumor rejection antigen recognized by HLA-A2402-restricted cytotoxic T lymphocytes"Cancer Res.. 61. 6459-6466 (2001)
• [Publications] N.Imai, N.Harashima, M.Ito, Y.Miyagi, M.Harada A.Yamada, K.Itoh.: "Identification of Lck-derived peptides capable of inducing HLA-A2-restricted and tumor-specific CTLs in cancer patients with distant metastases"Int.J.Cancer. 94. 237-242 (2001)
• [Publications] Y.Miyagi, N.Imai, T.Sasatomi, A.Yamada, T.Mine, K.Katagiri, M.Nakagawa, A.Muto, S.Okouchi, H.Isamoto, K.Shirouzu, H.Yamana, K.Itoh.: "Induction of cellular immune responses to tumor cells and peptides in colorectal cancer patients by vaccination of SART3 peptides"Olin.Cancer Res.. 7. 3950-3962 (2001)
• [Publications] M.Tsuru, K.Nagata, T.Ueno, A.Jimi, K.Irie, A.Yamada, T.Nishida, M.Sata.: "Electron microscopic observation of established chondrocytes derived from human intervertebral disc hernia (KTN-1) and role of macrophages in spontaneous regression of degenerated tissues"Spine J.. 1. 422-431 (2001)