2000 Fiscal Year Annual Research Report
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12670979
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
古川 達雄 新潟大学, 医学部・附属病院, 助教授 (00272849)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小池 正 長岡赤十字病院, 輪血部長
高橋 益廣 新潟大学, 医学部, 教授 (90179531)
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| Keywords | 白血病 / 樹状細胞 / CTL / TCR |
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| Research Abstract |
1.健常人から形成したDCを、白血病特異的融合ペプチドのbcr/abl fusion領域の12mer(GF KQSSKALQRP)peptideでpulseした後、反応してきたT cellのTCR repertoire解析とpulseしていないDCに反応したT cellのTCR repertoire解析の比較によりpe ptide pulse特異的に反応してきたTCRのCDR領域の塩基配列を決定する方法がほぼ確立された。ただ現在gene scanを用いた解析からのデーターを用いて、銀染色によるラダーとの対比を検討して、特異バンドを抜き取る方法、また実験系としてFBS培養系においてどの様な影響が出るか、さらにはCTL確立時のIL2添加の影響を検索中である。
2.血縁者間造血幹細胞を予定したCML症例(b3a2 type bcr/abl fusion)のドナーよりDCを誘導。B3a2 peptide pulsedおよびrecipient cell lysate pulsed DCを用い、さらに細胞を増やすためにIL2添加条件で、CTLを誘導した。このCTL lineはrecipientのcolony形成を阻害することが証明され、recipient細胞に対する細胞障害活性が証明された。その両者において増殖したT cell(CTL line)をFACS解析した結果は、どちらも大部分CD4陽性であった。またDC pulseされていないドナーリンパ球はrecipient colony形成を抑制しなかった。
3.得られたCTL lineについてTCR Vβ repertoire解析を施行。CTL活性が証明されたrecipent cell lysate pulsed DCとb3a2 peptide pulsed DCにprimeされたCTL共通peakとしていくつかのVβに観察された。現在それぞれののpeakに存在するVβ CDR3領域の配列を検索中である。
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