2000 Fiscal Year Annual Research Report
虚血性急性腎不全における細胞間接着装置の変化に関する研究
Project/Area Number |
12671040
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Research Institution | Kobe University |
Principal Investigator |
塚本 達雄 神戸大学, 医学部・附属病院, 助手 (00314485)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松井 利充 神戸大学, 医学部・附属病院, 講師 (10219371)
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Keywords | 急性腎不全 / 虚血 / 再環流 / タイトジャンクション / アドヘレンスジャンクション / チロシンキナーゼ / 脱リン酸化酵素 |
Research Abstract |
温度感受性v-src MDCK細胞を用いて、同細胞における細胞間接着因子のチロシンリン酸化反応を調べた。ZO-1、occludin 、claudin-1(tight junction)・E-cadherin、α-catenin、β-catenin、pp120(adherens junction)およびpaxillin(focal contact)に対する特異的抗体を購入し、40℃(v-srcは不活性)にて培養した細胞を35℃(v-src活性化)にて培養し(あるいは35℃にて培養の後、40℃にもどして)、経時的にそれぞれの蛋白にリン酸化度や細胞骨格蛋白との結合度評価を検討した。その結果、細胞間接着因子構成蛋白はv-src活性化によりチロシンリン酸化をうけ、特にZO-1は細胞骨格蛋白との結合度が著明に低下した。v-src不活化に伴いそのリン酸化度は減少することから、現在その脱リン酸化反応速度を調べるために、同細胞にチロシン脱リン酸化酵素をウイルスベクターを用いて導入し検討している段階である。
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[Publications] Bush,K.T.: "Rapid and selective degradation of E-cadherin, along with dissolution of E-cadherin-catenin complexes, in models of epithelial ischemia."American Journal of Physiology. 278. F847-F852 (2000)