セルロプラスミン遺伝子ノックアウトマウスの作製と、それに於ける膵B細胞の機能解析

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671098
• Research Institution: YAMAGATA UNIVERSITY
• Principal Investigator: 大門 真 山形大学, 医学部, 講師 (20241698)
• Keywords: セルロプラスミン / 遺伝子 / 糖尿病 / 遺伝製セルロプラスミン欠損症

Research Abstract

糖尿病の病因には遺伝因子と肥満、運動不足などの環境因子の両方がある。このうち糖尿病の遺伝因子については遺伝様式の研究から、特殊な症例を除けば、多因子が関与している事が判かっている。私達は、Cp遺伝子が糖尿病の病因の一つではないかと考えている。
しかし、血清Cp値の低下あるいは欠損が糖尿病の発生に関与する病態は不明である。そこで、Cp欠損あるいは減少が膵B細胞減少とどのように関係するのか、その機序を詳細に調べるために、Cp遺伝子のノックアウトマウスの作製を行った。
Cp遺伝子ノックアウトマウスの作製。Cp遺伝子のエクソン2にインフレームでn-LacZをつなげ、エクソン3にプロモーター付きのネオマイシン耐性遺伝子(PGK-Neo)を挿入したコンストラクトを完成させた。これにより、ネオマイシンによる選別法で相同組み換えをおこしているES細胞を得ることが可能となり、またベーター・ギャル染色にて組み換え体を持っている細胞の確認が可能となった。現在、本コンストラクトを用いてCp遺伝子のエクソン2及び3をノックアウトしたマウスを作るべく、ES細胞への本ベクターを導入する実験を行っている。今後相同組み換えが行われたES細胞を桑実胚に入れた後、仮親の子宮で発育させキメラマウスを得、さらにそれの交配を続けてノックアウトマウスを得るという実験を常法に従い行なった。

Research Products

• [Publications] Satoko Moriai: "Hypoceruloplasminemia in neurological disease"Internal medicine. 40・6. 548-549 (2001)
• [Publications] Makoto Daimon: "Increase in serum ceruloplasmin with aging is not observed in type 2 diabetes"Endocrine journal. 47・3. 215-219 (2000)
• [Publications] Makoto Daimon: "A novel mutation of the ceruloplasmin gene in a patient with heteroallelic ceruloplasmin gene mutation(HypoCPGM)"Tohoku Journal of Experimental medicine. 191・3. 119-125 (2000)