炎症性腸疾患発症への関与が強く示唆される大腸特異的未知遺伝子の解析

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671194
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 柴田 近 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (30270804)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 内藤 広郎 東北大学, 医学部・附属病院, 講師 (90180223) ; 佐々木 巌 東北大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (60125557) ; 福島 浩平 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (20271900) ; 舟山 裕士 東北大学, 医学部・附属病院, 講師 (50192315)
• Keywords: 腸内細菌 / 上皮細胞 / 生体防御 / exocytosis

Research Abstract

昨年度クローニングしたマウスsyncollinは、当初GeneBankに登録されていたBC019567と1塩基相違が見られたが、その後に登録されたAK003083と完全に一致した。ラットの膵外分泌細胞を用いた従来の報告では、Syncollinはカルシウム依存性にsyntaxinより解離する結果膜の融合がおこり、exocytosisを生じるとされる。さらに、リコンビナントのsyncollinを外因性に投与すると、exocytosisは強く抑制されると報告されている。今年度は、まずこの分子が基本的に大腸上皮に発現し、無菌マウスヘの腸内細菌導入によって発現が抑制されることをノザン解析により証明した。さらに、腸内細菌導入によって一過性の急性炎症を大腸に認めるため、syncollin mRNAの抑制が粘膜炎症に広く認められるか否かを検討する目的でdextran sulfate sodium誘導大腸炎での発現を検討したところ、大腸上皮におけるsyncollin mRNAの抑制は認められなかった。一方、各種臓器、消化管上皮細胞における、syncollin mRNAの発現を定量的RT-PCRにより見たところ、心、肺、脾、腎、肝、精巣、胃空腸、回腸上皮には発現せず膵に最も強く発現し次いで大腸、十二指腸上皮に発現していた。ヒトホモローグのクローニングについて相同性を有するXM092067に基づき、RACE法によりクローニングを行った。さらに、炎症腸疾患大腸上皮における発現を定量的RT-PCRで検討すると、潰瘍性大腸炎で有意の低下を認めたのに対しクローン病では対照群との差を認めなかった。腸内細菌の導入あるいは潰瘍性大腸炎では、syncollin分子の発現そのものを抑制することによってfreeのsyntaxinを増加させexocytosisを調節している可能性が考えられた。