炎症性腸疾患における粘膜固有層内リンパ球の細胞障害活性の検討――新しい選択的免疫療法の開発に向けて――

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671217
• Research Institution: Gifu University
• Principal Investigator: 仁田 豊生 岐阜大学, 医学部・附属病院, 助手 (70313905)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 広瀬 一 岐阜大学, 医学部, 教授 (20101272) ; 岩田 尚 岐阜大学, 医学部・附属病院, 講師 (90303495)
• Keywords: 炎症性腸疾患 / TNBS腸炎 / 細胞障害活性 / T細胞レセプター / Vβレパートリー

Research Abstract

【目的】C3H/He(C3H)マウスリンパ節より樹立したクローンを用いて細胞障害性T細胞であるTCRVβ14陽性CD8+T細胞が、in vitro、in vivoにおいていかなる機能を有しているかを解析した。【方法】ELISA法:抗CD3ε抗体或いはTNBS修飾脾細胞の刺激下におけるTCRVβ14陽性CD8+T細胞クローン(以下クローン)のサイトカイン産生(IL-2,IL-4,IFNγ)をELISA法で検討した。細胞移入実験:C3HマウスにTNBSを注腸した後、クローンを細胞移入した。細胞移入後の体重変化、下痢症状の有無、病理学的所見(H.E.染色、TUNEL法)を検討した。【結果】1)クローンは,IFNγを産生していた。IL-2,IL-4の産生は認めなかった。2)a)TNBS7mg/0.1mlエタノール注腸投与によってC3Hマウスは,細胞移入非施行群と細胞移入群いずれも腸炎所見を呈した。体重変化に差は認めなかったが、下痢症状は、細胞移入群で増強していた。TUNEL法の検討において、TUNEL陽性細胞は、細胞移入非施行群に比して細胞移入群で増加していた。B)TNBS0.07mg/0.1mlエタノール注腸投与した細胞移入非施行群マウスは、ほぼ正常の病理像を呈したのに対し、細胞移入群は体重変化には差はないものの下痢症状の増強、炎症細胞浸潤を伴う病理学的腸炎所見、及びTUNEL陽性細胞の増加を認めた。【まとめ】TNBS誘導性腸炎マウス粘膜固有層内で増殖するCD8+TCRVβ14陽性T細胞は,in vitroでkiller活性を有しIFNγを産生するTc1と考えられ、腸管局所においても少量のTNBSに反応しアポトーシスを伴う腸炎を誘導し得た。なお,結果1)に関しては,11th International Congress of Immunology(7/27,ストックホルム)で発表した.