ヒト尿道のエンドセリン受容体の検討とエンドセリンの腹圧性尿失禁治療への可能性

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671520
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 森山 信男 東京大学, 医学部・附属病院, 講師 (80143501)
• Keywords: ヒト尿道 / エンドセリン受容体 / エンドセリン受容体mRNA / competitive RT-PCR

Research Abstract

本年度は,主としてヒト尿道組織を用いて、エンドセリン受容体についてcompetitive reverse transcriptase polymerase chain reaction(RT-PCR)を行ない、尿道各部におけるエンドセリン受容体の各サブタイプの量ならびに比を調べた。
【方法】:Åsbergらの方法(Scand J Clin Lab Invest 58:299-306,1998)に準じてendothelin A(ET_A)とendothelinB(ET_B)受容体サブタイプのmRNA並びにpreproendothelin-1(ET-1)mRNAのprimerならびにcompetitiorを作成し、膀胱腫瘍に対する膀胱尿道全摘症例の尿道標本にたいしてcompetitive reverse transcriptase polymerase chain reaction(RT-PCR)をおこなった。尿道標本は外尿道口から膀胱頸部までそれぞれ数切片に分断し、それぞれの部位におけるエンドセリン受容体の半定量を行い、その差異を検討した。作成したprimerは下記の通りであり、PCR産物はET_A=378,ET_B=333,preproET-1=446である。またcompetitorはTAKARA Competitive DNA constructin kitを使用し、ET_A,ET_B,preproET-1に対してそれぞれ250R,200R,300Rのcompetitorを作成した。
ET_A:sense ctctgcgctcttagtgttga/antisense acgctgcttaagatgttc
ET_B:sense aatggacagcagtagaaattg/antisense gaccaggcaaaagacggttttgg
preproET-1:sense tctacttctgccacctggacat/antisense ctcggttgtgggtcacataa
【結果】:男性尿道を近位尿道から遠位尿道まで4分割して測定したが、各部位ともET_A,ET_B,preproET-1の割合はほぼ一定で3×10^5〜10^6competitor量(copy)であった。女性尿道は近位尿道から遠位尿道までの3分割した。いずれの尿道部位でもET_A,ET_B,preproET-1ともほぼ一定で3×10^5〜10^6competitor量(copy)であった。
【結語】:男女とも尿道各部位のエンドセリン受容体のサブタイプ(ET_AとET_B)並びにpreproET-1の量はいずれもほぼ同量であり、かつ、部位による差異は見られなかった。即ち、全尿道におけるエンドセリン受容体のサブタイプはAとBともほぼ同量存在すると思われる。

Research Products

• [Publications] Akaza,H.,Homma,Y.,Okada,K.,Yokoyama,M.,Moriyama,N., et al.: "Early Results of LH-RH agonsit treatment with or without chlormadinone acetate for hormone therapy of naive localized or locally advanced prostate cancer : A prostective and randomized study."Jpn.J.Clin.Oncol.. 30. 131-136 (2000)
• [Publications] Suzuki,Y.,Moriyama,N., et al.: "Distribution of α_<1L>-adrenoceptor in canine prostate : characterization by quantitative autoradiography."J.Pharm.Pharmacol.. 52. 653-657 (2000)
• [Publications] Ahmed,H.,Moriyama,N., et al.: "Contractile properties of urethral smooth muscles of young and aged female dogs-morphological and pharmacological aspects-"Int.J.Urol.. 7. 298-306 (2000)
• [Publications] Shindo,T.,Kuriharal,H.,Kuno,K.,Yokoyama,H.,Wada,T.,Kurihara,Y.,Imai,T.,Wang,Y.,Ogata,M.,Nishimatsu,H.,Moriyama,N., et al.: "ADAMTS-1 : a metalloproteinase-disintegrin essential for normal growth, fertility, and organ morphology and function."J.Clin.Invest.. 105. 1345-1352 (2000)
• [Publications] Takeuchi,T.,Nishimatsu,H;Ueki,T.,Kajiwara,T.,Fukuhara,H.,Ishida,T.,Moriyama,N., et al.: "Differentially expressed mRNAs in androgen-independent but not androgen-dependent Shionogi carcinoma."Urol.Research. 28. 82-85 (2000)
• [Publications] 森山信男: "定量的オートラジオグラフィーin神経泌尿器科学研究法これから研究を志す人のために(高橋公太監修、武田正之編集)"日本医学館. 172(87-95) (2000)