ヒト精巣腫瘍細胞特異性プロモーターを応用した精巣腫瘍遺伝子治療法の開発

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671530
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 後藤 章暢 神戸大学, 医学部, 助手 (70283885)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 守殿 貞夫 神戸大学, 医学部, 教授 (30030935) ; 白川 利朗 神戸大学, 医学部・附属病院, 医員
• Keywords: 精巣腫瘍 / 遺伝子治療 / 細胞特異性 / β-HCG / プロモーター / アデノウイルス / TK

Research Abstract

本研究では、化学療法抵抗性の進行性精巣腫瘍患者の約7割以上で血清β-HCG(ヒト絨毛性ゴナドトロピン)の上昇を認めることから、β-HCGのプロモーターを臓器特異性プロモーターとして応用した遺伝子治療法の開発とその有用性を研究目標とした。我々はβ-HCGプロモーターとして729塩基対のDNAサイズを選択する予定であるが、他にも様々なサイズのβ-HCGプロモーターのDNAをクローニングし、精巣腫瘍細胞における、それぞれのプロモーター活性を測定し、精巣腫瘍に対する遺伝子治療に最も適したβ-HCGプロモーターのサイズの決定を試みた。結果的にクローニングした729塩基対のβ-HCGプロモーターDNAの特異性が最も優れており、それをルシフェレース遺伝子を組み込んだプラスミドベクターに挿入した。そのプラスミドベクターを様々な細胞(絨毛癌細胞(JAR)、胎児性癌細胞(NEC8、NEC14)、前立腺癌細胞(PC-3、DU145)、膀胱癌細胞(WH))に遺伝子導入して、ルシフェレース活性を測定し、β-HCGプロモーターの細胞特異的活性を確認した。結果はβ-HCGを産生する絨毛癌細胞(JAR)、胎児性癌細胞(NEC8、NEC14)にのみ高レベルのプロモーター活性を認めた。これらの研究成果によりβ-HCGプロモーターを用いたヒト精巣腫瘍遺伝子治療の有用性が確認された。
現在、癌細胞および正常細胞の双方において多種の細胞について実験を行い、β-HCGプロモーターの臓器特異性をさらに詳細に検討中である。
同時に精巣腫瘍に対する遺伝子治療としてクローニングした729塩基対β-HCGプロモーターを用いてAd-β-HCG-TKを作製しており、その有効性を検討中である。