2000 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
12671558
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Research Institution | Tokyo Dental College |
Principal Investigator |
宮地 系典 東京歯科大学, 歯学部, 助手 (20229850)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石川 博通 東京歯科大学, 歯学部, 助教授 (60112679)
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Keywords | ヒト精子 / 先体反応 / 血漿 / アデニルプリン / アルブミン / 精漿 |
Research Abstract |
1.血漿、精漿中にはアデニルプリンが存在した。血漿ではATPが約50%を占め、アデノシン、cAMPは検出限界以下であった。一方、精漿ではアデノシンが約57%を占め、ATPは1%以下であり、両者のアデニルプリン構成比は大きく異なっていた。 2.市販アルブミン標品(ヒト、ウシ)に吸着した低分子物質、特にアデニルプリンを検索した結果、アルブミンにはアデノシンが含有されていることをみいだした。 3.精子に対するアデニルプリンの影響観察を企画した。精漿には、アデニルプリン分解活性が存在するので、キャピラール直線密度勾配法により精子を調製した。酸性フォスファターゼ活性を指標として調製した精子懸濁液中の精漿残存率を測定した結果、0.003%であり、精漿をほぼ完全に除去できた。懸濁液中におけるATPの安定性を確認した。 4.FITC-concanavalin A,PI蛍光二重染色法を確立し、先体反応の定量的評価が可能となった。 5.ATPは先体反応誘起を促進し、その作用はATP受容体拮抗薬により消失した。種々のATP受容体作動薬の影響を検討した結果、UTPが最も強い先体反応誘起促進作用を示した。ATP、UTPによる先体反応誘起促進作用は、PKC阻害剤、Caチャネル阻害剤により消失した。 6.卵周囲を覆う顆粒膜細胞がATPを分泌している可能性が示された。 7.アデノシンは濃度依存的に先体反応誘起を抑制した。 以上の結果から、精液中ではアデノシンが先体反応を抑制し、先体反応誘起の場である卵周囲では、ATPが反応を促進している可能性が示唆され、アデニルプリンが先体反応に重要な役割を果たしている可能性が考えられた。
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