未熟卵胞の異種間移植による卵胞・卵子成熟機構に関する基礎的研究

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671574
• Research Institution: Asahikawa Medical College
• Principal Investigator: 千石 一雄 旭川医科大学, 医学部, 助教授 (30163124)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田熊 直之 旭川医科大学, 医学部, 助手 (10312464)
• Keywords: 原始卵胞 / マイクロカプセル / 凍結保存 / oocyte factor / フリーラジカル / 異種間移植

Research Abstract

凍結保存融解後のマウス未熟卵胞(原始卵胞、一次卵胞)の異種間移植のためのマイクロカプセルを開発し、未熟卵胞を異種動物(ラット)へ移植し、成熟卵胞・卵子を獲得すること、また、この異種間未熟卵胞移植の実験モデルから、初期卵胞の発育機構に関し、卵細胞からのシグナリングを中心に解明することを最終目的として研究を行った。
その結果、緩徐凍結・急速融解法により未熟卵胞の凍結保存の可能性が示唆され、一酸化窒素(NO)および活性酸素の消去が凍結融解後の生存率の向上に寄与することを明らかにした。一方、卵子成熟、初期胚発育、着床におけるNOの重要性を示唆した。また、マイクロカプセルを用いた未熟卵胞の体外成熟、同種間移植による卵胞の成熟が確認されたが、異種間移植には成功しておらず、今後、免疫抑制剤の検討、マイクロカプセルの改良など検討の必要性が示された。また、HB-EGFが卵子、卵胞発育、黄体形成に重要な役割を有していることを明らかにし、さらに、体外成熟した卵の受精に必須であると考えられる顕微授精法の細胞学的安全性を染色体レベルで明らかにした。一方、卵胞発育に関するシグナリングに関する検討においては未熟卵子にGDF-9,C-kitのmRNAの発現を確認したが、今後、FAK, FLT3,c-fmsを含め定量的検討が必要であると考えられた。

Research Products

• [Publications] Sengoku K et al.: "Requirement of nitric oxide for murine oocyte maturation, embryo development, and trophoblast outgrowth in vitro"Molecular Reproduction and Development. 58(3). 262-268 (2001)
• [Publications] S.Dinara, K.Sengoku et al.: "Effects of supplementation withnfree radical scavengers on the survival and fertilization rates of mouse cryopreserved oocytes"Human Reproduction. 16(9). 1976-1981 (2001)