骨芽細胞における炎症性サイトカイン誘導アポトーシス機構の解明

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671821
• Research Institution: Aichi Gakuin University
• Principal Investigator: 茂木 眞希雄 愛知学院大学, 講師 (00174334)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 近藤 史実 愛知学院大学, 歯学部, 助手 (70301629) ; 新井 通次 愛知学院大学, 歯学部, 講師 (20097538) ; 戸苅 彰史 愛知学院大学, 歯学部, 教授 (80126325)
• Keywords: 骨芽細胞 / アポトーシス / サイトカイン

Research Abstract

(1)研究背景 骨の形成と吸収を制御する因子として、サイトカインの役割は広く認識されており、大量のサイトカイン処理は細胞に対し毒性を発揮し、最終的にアポトーシス様細胞死を惹起すると報告されている。(2)研究目的 1)サイトカインによる骨芽細胞(MC3T3-E1 cells)のアポトーシス様細胞死がどのような細胞内シグナルにて惹起されるか。具体的にはFas/Fas Ligandによるautocrine death systemが存在するかどうかついて、基礎的な検討を行った。(3)結果 1)炎症性サイトカイン(IL-1β,TNF-α,IFN-γ)で処理することは、強い細胞増殖抑制および細胞死を示し、FACSを用いたAnnexin-V/PI double stainingによりこの細胞死がアポトーシスを介したものと確認した。2)サイトカイン処理によりFas mRNAならびにproteinが産生誘導されたが、これはシグナル伝達の鍵分子であるMAP kinaseの阻害剤(PD98059,SD203580)前処理にてなんの影響も受けなかった。3)Fasの生体内リガンドであるFas ligandが恒常的に本細胞に存在することを確認した。4)Fas Ligandの添加はサイトカイン誘導アポトーシスをさらに亢進させた。以上のことから骨芽細胞におけるサイトカイン誘導アポトーシスはFas/Fas Ligandによるautocrine death systemの活性化を介して起こることが示唆された。現在、実験結果を踏まえての総括的な考察及び付加的実験を行っている。結果の一部は歯科基礎医学会、JADR、IADR大会、日本歯科保存学会にて発表を行い、また現在、掲載論文(Archs Oral Biol.)が印刷中である。

Research Products

• [Publications] Ozeki, N., et al.: "Differential expression of Fas-Fas ligand system on cytokine-induced apoptotic cell death in mouse osteoblastic cells"Archives of Oral Biology. (in press).
• [Publications] Kotake, S., et al.: "Activated human T cells directly induce osteoclastogenesis from human monocytes : Possible role of T cells in bone destruction in rheumatoid arthritis patients"Arthritis and Rheumatism. 44(5). 1003-1012 (2001)
• [Publications] Kondo, A., et al.: "Signal transduction system for IL-6 and IL-11 synthesis stimulated by epinephrine in human osteoblasts and human osteogenic sarcoma cells."Biochemical Pharmacology. 61. 319-326 (2001)
• [Publications] Mogi, M., et al.: "Glial cell line-derived neurotrophic factor in the substantia nigra from control and parkinsonian brains."Neuroscience Letters. 300. 179-181 (2001)