人工脂質被覆糖類を用いた高分子膜によるサイトカインキャリア材の研究

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671917
• Research Institution: Fukuoka College of Health Sciences
• Principal Investigator: 井上 勇介 福岡医療短期大学, 歯科衛生学科, 助教授 (20105688)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 河合 達志 愛知学院大学, 歯学部, 講師 (60167351) ; 岡畑 恵雄 東京工業大学, 生命理工学部, 教授 (80038017) ; 福島 忠男 福岡歯科大学, 歯学部, 助教授 (80084250)
• Keywords: サイトカイン / BMP / 脂質 / 糖類 / 高分子膜

Research Abstract

p-トルエンスルホン酸-水和物存在下でアルキル鎖長の異なる3種のn-アルキルアルコール(1-Octanol,1-Decnol,1-Dodecanol)とL-アラニン、グリシン、L-グルタミン酸とで合計9種の脂質(Glycine octyl ester p-toluensulfonic acid salt,Glycine decyl ester p-toluensulfonic acid salt,Glycine dodecyl ester p-toluensulfonic acid salt,L-alanine octyl ester p-toluensulfonic acid salt,L-alanine decyl ester p-toluensulfonic acid salt,L-alanine dodecyl ester p-toluensulfonic acid salt,Octyl-L-glutamate p-toluensulfonic acid salt,Decyl-L-glutamate p-toluensulfonic acid salt,Dodecyl-L-glutamate p-toluensulfonic acid salt)を合成した。これらの中からL-alanine decyl ester p-toluensulfonic acid saltを蒸留水に溶解し、同様に蒸留水に溶解したアルギン酸とを撹拌混合し、白色懸濁溶液を得た。この白濁溶液を遠心分離機で分離し、蒸留水にて洗浄した。洗浄、遠心分離の工程を数回繰り返した後に最終的に遠心分離した沈殿物を凍結乾燥で24時間乾燥し白色粉末の人工脂質被覆アルギン酸を得た。
一方、BMPの抽出・精製は以下の如く行った。牛下肢骨を粉砕・脱灰しタンパク質成分のみに調整した後、コラーゲンを除去する。グアニジン塩酸により可溶化し、抽出液を濃縮した後、数回の透析を行って精製を行い、さらにゲルろ過を行って水溶性のBMPを精製した。この水溶性BMPを蒸留水に溶解し、合成したDidocyl-N-Glucono-L-Glutamateを微量のアセトンで溶解した溶液と反応させ、白色懸濁溶液を得た。これを遠心分離し凍結乾燥を行って白色粉末の人工脂質被覆BMPを得た。現在、これらの人工脂質被覆アルギン酸と人工脂質被覆BMPの混合物をラットの大腿部に埋入し、病理組織像から炎症反応、組織への吸収特性を、また、軟X線像、病理組織像から骨形成状態を検討している。