新しい腫瘍関連抗原MK-1の臨床応用に向けての具体的検討

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12672261
• Research Institution: Fukuoka University
• Principal Investigator: 黒木 政秀 福岡大学, 医学部, 教授 (40122692)
• Keywords: 腫瘍関連抗原 / 腫瘍マーカー / EIA / MK-1 / 17-1A / GA733-2 / モノクローナル抗体 / FU-MK-1

Research Abstract

モノクローナル抗体FU-MK-1が認識する新しい腫瘍関連抗原MK-1は,消化器癌を始めとするほとんどの癌腫に存在するめずらしい抗原である.われわれは,これまでこの抗原が分子量約4万の膜貫通型糖タンパク質であること,また対応する遺伝子クローニングから,この抗原がCEA,AFP,CA19-9など既存のいずれの抗原とも違うことを証明してきた.本研究は,以上のような背景に基づき,新しい腫瘍抗原MK-1の癌の血清診断における意義とこの抗原を分子標的にした治療に向けての意義を総合的に検討しようとするもので,平成12年度は,次のような点を目標にした.すなわち,1)組換えMK-1タンパクを利用した標準MK-1抗原を量産し,新たなモノクローナル抗体を作製する.2)MK-1抗原のEIA系を確立し,血中MK-1抗原を測定してその臨床的意義を解析する.
まず,分泌型に変えた組替えMK-1タンパクをカイコ幼虫に発現させ,体液より精製した.精製MK-1でマウスを免疫し,通常の方法でモノクローナル抗体を作製した.抗原決定基を異にする2種のクローンを選んでサンドイッチEIAシステムを組み,正常人血清と癌患者血清中のMK-1を定量した.EIAでは組換えMK-1を標準抗原として,2-1000ngの範囲で検量線が得られた.次に血清について調べた結果,正常人30例ではすべて検出感度(2ng/ml)未満であった.種々の癌患者血清では236例中24例が陽性(2ng/ml以上)で,最高例は75ng/mlであった.
以上のことは,MK-1は他の腫瘍マーカーと違って血中には遊離しにくいが,MK-1陽性でほかのマーカーが陰性の場合,治療後の経過観察に利用できることを示している.また,症例によっては高値を示し,MK-1を標的とする免疫療法や遺伝子治療を試みるとき留意する必要があることを示している.

Research Products

• [Publications] Tomita,Y.,Arakawa,F.,Liao,S.,Khare,P.D.,Kuroki,Mo.,Yamamoto,T.,Ariyoshi,A.,Kuroki,Ma.:: "Carcinoma-associated antigens MK-1 and CEA in urological cancers."Anticancer Res.. 20・2A. 793-797 (2000)
• [Publications] Tomita,T.,Arakawa,F.,Yamamoto,T.,Kuwahara,M.,Watanabe,R.,Iwasaki H.,Kikuchi,M.,Kuroki,Ma.:: "Molecular identification of a human carcinoma-associated glycoprotein antigen recognized by mouse monoclonal antibody FU-MK-1."Jpn.J.Cancer Res.. 91・2. 231-238 (2000)
• [Publications] Miyajima-Uchida,H.,Hayashi,H.,Beppu,R.,Kuroki,Mo.,Fukami,M.,Arakawa,F.,Tomita,Y.,Kuroki,Ma.: "Production and accumulation of thrombospondin-1 in human retinal pigment epithelial cells."Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.. 41・2. 561-567 (2000)
• [Publications] Egawa,K.,Honda,Y.,Kuroki,Ma.,Ono,T.: "The carcinoembryonic antigen (CEA) family (CD66) expressed in melanocytic naevi is not expressed in blue naevuscell naevi in dendritic type."J.Cutan.Pathol.. 27・7. 351-358 (2000)
• [Publications] Oikawa,S.,Sugiyama,M.,Kuroki,M.,Kuroki,Ma.,Nakazato,H.: "Extracellular N-domain alone is sufficient for specific heterophlic adhesion between members of carcinoembryonic antigen family, CD66b and CD66c."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 278・3. 564-568 (2000)
• [Publications] Khare,P.D.,Liao,S.,Kuroki,Mo.,Hirose,Y.,Arakawa,F.,Nakamura,K.,Tomita,Y.,Kuroki,Ma.: "Specifically targeted killing carcinoembryonic antigen (CEA)-expressing cells by a retroviral vector displaying single chain variable fragmented (scFv) antibody to CEA and carrying the gene for inducible nitric oxide synthase (iNOS)."Cancer Res.. 61・1. 370-375 (2001)
• [Publications] Khare,P.D.,Liao,S.,Kuroki,M.,Arakawa,F.,Kuroki,Ma.: "2nd Congress of the Federation of Immunological Societies of Asia-Oceania (FIMSA) (S.Sirisinha,S.C.Chaiyaroj and P.Tapchaisri, eds.)"Monduzzi Editore, Bologna (Italy). 160 (2000)