2001 Fiscal Year Annual Research Report
ペルオキシソーム形成機構の解明-特に膜構造の形成について-
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12680614
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| Research Institution | HIMEJI INSTITUTE OF TECHNOLOGY |
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Principal Investigator |
塚本 利朗 姫路工業大学, 理学部, 助手 (30236864)
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| Keywords | ペルオキシソーム / オルガネラ形成 / 遺伝病 |
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| Research Abstract |
多くのペルオキシソーム欠損細胞には、ペルオキシソーム膜タンパク質は存在するが、マトリックスタンパク質が内部に存在しないゴーストと呼ばれる膜構造が認められる。AAA family ATPasesに属するPEX6を欠損したCHO細胞(ZP92)には、電顕による観察により、2種類の膜からなる"complex membrane structure"が認められた。これは、一枚の膜に囲まれたボール状構造が、二層からなる狭いルーメンを持ったdouble membraned loopに取り囲まれており、最外層にERを伴っていた。ZP92にPEX6 cDNAを導入した際の、ペルオキシソーム形成の初期過程において、double membraned loopの内部にのみ局所的なカタラーゼの蓄積が認められた。35Sを用いた標識実験により、相補過程において、complex membrane structureからペルオキシソームが形成されることを明らかにした(研究発表1)。
さらに、ペルオキシソーム膜を可視化するために、ペルオキシソーム膜タンパク質あるいはペルオキシソーム膜に存在すると報告されているPEX遺伝子産物をタグで標識し、光顕、および電顕レベルでその局在を観察する系を構築した。その過程で、PEX11の発現により、ペルオキシソームの凝集がおき、その凝集は電顕レベルではヘテロな膜構造からなることを見いだした。現在、PEX11による凝集機構を明らかにすると共に、ペルオキシソーム形成過程において、2種類以上の膜構造が関わっている可能性について、さらに検討を行っている。
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[Publications] N.Hashiguchi, T.Kojidani, T.Imanaka, T.Haraguchi, Y.Hiraoka, E.Baumgart, S.Yokota, T.Tsukamoto, T.Osumi: "Molecular Biology of the Cell"Peroxisomes Are Formed from Complex Membrane Structures in PEX6-deficient CHO Cells upon Genetic Complementation. (in press). (2002)
