2002 Fiscal Year Annual Research Report

好中球グライコシグナリングドメインの構造と機能に関する研究

Research Project

Project/Area Number	12680616
Research Institution	Juntendo University
Principal Investigator	岩渕和久順天堂大学, 医学部, 講師 (10184897)
Keywords	好中球 / ラクトシルセラミド / グリコシグナリングドメイン / 活性酸素産生 / Lyn / p38MAPK / マイクロドメイン / スフィンゴ糖脂質
Research Abstract	好中球は、造血幹細胞から分化・成熟すると、スフィンゴ糖脂質であるラクトシルセラミド(LacCer, CDw17)を細胞膜上に発現する。また、グラム陽性、陰性を問わず様々な細菌や真菌がLacCerと選択的に結合する。さらに、好中球はLacCerを介して活性酸素産生を産生する。したがって、LacCerは好中球の貪食機構に関与すると考えられるが、その詳細は不明であった。昨年度までに、好中球がLynと会合したLacCerのglycosignaling domainを細胞膜表面に形成していて、リガンドがLacCerに結合することで、glycosignaling domainでLynが活性化され、さらに細胞内のPI3 kinase、p38 MAPK、protein kinase Cが関与するカスケードを活性化し、好中球は活性酸素を産生することを明らかにした。今年度は、前骨髄性白血病細胞株であるHL-60細胞がDMSOで処理することで好中球に分化し、活性酸素産生能を獲得することに着目し、HL-60細胞を好中球系に分化させた場合の、LacCerのGSDを介した活性酸素の産生について検討した。HL-60細胞は未分化な状態でもLacCerを細胞膜表面に発現しており、DMSOで処理しても、発現レベルに変化は無かった。DMSO処理HL-60細胞は、fMLPによって活性酸素を産生したが、坑LacCer抗体によっては活性酸素を産生しなかった。HL-60細胞の細胞膜から調製した糖脂質ミクロドメインには、好中球と同様に、LacCerとLynが局在していた。しかしながら、ミクロドメインの画分を抗LacCer抗体で免疫沈降すると、DMSOで処理したHL-60細胞からはLynが回収されなかった。従って、HL-60細胞はLacCerを含むマイクロドメインを持っているが、このドメインでLacCerとLynが会合していないために、好中球のようなLacCerを介したLynの活性化が起こらず、活性酸素を産生できないと考えられる。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Kazuhisa Iwabuchi: "Effect of synthetic sialyl 2-->1 sphingosine and other glycosylsphingosines on the structure and function of the "glycosphingolipid signaling domain (GSD)" in mouse melanoma B16 cells"Biochemistry. 39・10. 2459-2468 (2000)
[Publications] Kazuhisa Iwabuchi: "Reconstitution of membranes simulating "glycosignaling domain" and their susceptibility to lyso-GM3"J.Biol.Chem.. 275・20. 15174-15181 (2000)
[Publications] Kazuhisa Iwabuchi: "Separation of glycosphingolipid-enriched microdomains from caveolar membrane characterized by presence of caveolin"Methods in Enzymology. 312. 488-494 (2000)
[Publications] 岩渕和久: "グリコシグナルドメインによる情報伝達と細胞機能発現"蛋白質・核酸・酵素. 47. 357-364 (2002)
[Publications] Kazuhisa Iwabuchi: "Lactosylceramide-enriched glycosphingolipid signaling domain mediates superoxide generation from human neutrophils"Blood. 100. 1454-1464 (2002)
[Publications] Ohwada A., et al.: "VEGF regulates the proliferation of acid-exposed alveolar lining epithelial cells"Thorax. (印刷中).

2002 Fiscal Year Annual Research Report

好中球グライコシグナリングドメインの構造と機能に関する研究

Principal Investigator

岩渕 和久 順天堂大学, 医学部, 講師 (10184897)

Research Products

[Publications] Kazuhisa Iwabuchi: "Effect of synthetic sialyl 2-->1 sphingosine and other glycosylsphingosines on the structure and function of the "glycosphingolipid signaling domain (GSD)" in mouse melanoma B16 cells"Biochemistry. 39・10. 2459-2468 (2000)

[Publications] Kazuhisa Iwabuchi: "Reconstitution of membranes simulating "glycosignaling domain" and their susceptibility to lyso-GM3"J.Biol.Chem.. 275・20. 15174-15181 (2000)

[Publications] Kazuhisa Iwabuchi: "Separation of glycosphingolipid-enriched microdomains from caveolar membrane characterized by presence of caveolin"Methods in Enzymology. 312. 488-494 (2000)

[Publications] 岩渕和久: "グリコシグナルドメインによる情報伝達と細胞機能発現"蛋白質・核酸・酵素. 47. 357-364 (2002)

[Publications] Kazuhisa Iwabuchi: "Lactosylceramide-enriched glycosphingolipid signaling domain mediates superoxide generation from human neutrophils"Blood. 100. 1454-1464 (2002)

[Publications] Ohwada A., et al.: "VEGF regulates the proliferation of acid-exposed alveolar lining epithelial cells"Thorax. (印刷中).

岩渕和久順天堂大学, 医学部, 講師 (10184897)