2003 Fiscal Year Annual Research Report
細胞接着因子ギセリンの成熟神経系における新しい機能解析
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12680753
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
平 英一 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (60263240)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田中 秀和 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (70273638)
三木 直正 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (40094445)
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| Keywords | 細胞接着因子 / ゲノミッククローニング / 発現制御 / 神経突起伸展 |
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| Research Abstract |
1)ギセリンのゲノミッククローニングと上流解析
我々はギセリン遺伝子のクローニングを行った後、その遺伝子の上流解析を行った。このために上流域6kbpのクローニングを行い、さらに上流域をルシフェラーゼレポーター遺伝子を含むプラスミドに導入した。さらに、このプラスミドをPC12細胞に導入し、各種の増殖因子による刺激への反応性の検討を行った。更にその中で反応を示す因子に関してはその責任領域を決定するために上流域の各種欠損ミュータントを作製しその責任領域を決定した。次いでゲルシフト法を行い、そこに結合する転写因子の存在を確認し、刺激によるその結合の増大を確認した。
2)PC12細胞における神経突起伸展へのギセリンの影響の検討
PC12細胞に1-ギセリン発現プラスミド、コントロールとしてギセリンの膜貫通領域のみを含むプラスミドを導入し、コントロールに比してギセリン全長の発現増大によりNGFによる神経突起伸展が増強することを明らかとした。
3)トランスジェニックマウス作製
ギセリンの神経系における機能を解析するために、L-ギセリンcDNAをニューロフィラメント遺伝子のプロモーターの下流に結合させたものをマウスに導入したトランスジェニックマウスの作成を行った。この際にGFPをニューロフィラメントプロモーターにつないだものも同時に導入し、これまでに3系統のダブルトランスジェニックマウスと1系統のGFP単独発現トランスジェニックマウスを樹立さぜた。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] S.Hiroi, Y.Tsukamoto, F.Sasaki, N.Miki, E.Taira: "Involvement of gicerin, a cell adhesion molecule, in development and regeneration of chick sciatic nerve"FEBS Lett.. (in press). (2004)
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[Publications] S.Tsuchiya, Y.Tsukamoto, M.Furuya, S.Hiroi, N.Miki, F.Sasaki, E.Taira: "Gicerin promotes the metastasis of MDCC-MSB1 cells derived from Marek disease lymphoma"Cell Tissue Res.. (in press). (2004)
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[Publications] S.Okumura, K.Kohama, S.Kim, H.Iwao, N.Miki, E.Taira: "Induction of gicerin/CD146 in the rat carotid artery after balloon injury"Biochem.Biophys.Res.Comm.. 313. 902-906 (2004)
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[Publications] E.Kumamaru, C-H.Kuo, T.Fujimoto, K.Kohama, L-H.Zeng, E.Taira et al.: "Reticulon3 expression in rat optic and lofactory systems"Neurosci.Lett.. 356. 17-20 (2004)
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[Publications] E.Taira, Y.Tsukamoto, K.Kohama, M.Maeda, H.Kiyama, N.Miki: "Expression and involvement of gicerin, a cell adhesion molecule, in the development of chick optic tectum"J.Neurochem.. 88. 891-899 (2004)
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[Publications] E.Taira, K.Kohama, Y.Tsukamoto S.Okumura, N.Miki: "Characterization of gicerin/MUC18/CD146 in the rat nervous system"J.Cell.Physiol.. 198. 377-387 (2004)
