2000 Fiscal Year Annual Research Report
大腸菌O157における志賀毒素産生に関与する遺伝子の機能解析
Project/Area Number |
12770145
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Research Institution | Kinki University |
Principal Investigator |
宮本 裕史 近畿大学, 生物理工学部, 助手 (20271413)
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Keywords | O157 / ベロ毒素 / Qタンパク質 |
Research Abstract |
腸管出血性大腸菌O157感染により溶血性尿毒症などの重篤な症状が惹起されるが、そのメカニズムは解明されていない。しかしながら、O157に内在するファージにコードされるべロ毒素が症状を惹起する上で中心的な役割をになっていることが明らかにされている。べロ毒素は構造上VT1,VT2の2種類に大別され、それぞれO157に溶原化する別々のファージににより生産される。本研究では、VT2毒素を産生するVT2-Saファージの初期制御領域の遺伝子であるcIリプレッサーに着目し、VT2溶原菌におけるcIリプレッサー遺伝子の発現状況を調べた。その結果、cIリプレッサーがVT2-Saを溶原化した大腸菌K12において発現することがRT-PCRにより明らかとなった。次に、毒素遺伝子を含む後期遺伝子群の転写を制御していると思われるQタンパク質に関して、後期プロモーターであるpR'に対する効果を調べた。pR'プロモーターをルシフェラーゼ遺伝子の上流に連結し、ルシフェラーゼ活性を指標としてpR'のプロモーター転写促進作用を調べたところ、Qタンパク質存在下において特異的にルシフェラーゼ活性が上昇することが示された。このことから、後期遺伝子群の転写においてQタンパク質はpR'プロモーターからの転写の抗転写終結因子として機能していると思われる。
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[Publications] Yamada,N.: "Cloning and expression of the mouse Pse gene encoding a novel Ets family member"Gene. 241. 267-274 (2000)
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[Publications] Miyamoto,H.: "Sequence of a cDNA encoding a novel basic protein expressed in rabbit placenta"Jpn.J.Fertil.Steril.. 45. 37-39 (2000)
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[Publications] Miyashita,T.: "Complementary DNA cloning and characterization of pearlin, a new class of matrix protein in the nacreous layer of oyster pearls"Marine Biotechnol. 2. 512-521 (2000)