2001 Fiscal Year Annual Research Report
パラインフルエンザ2型ウイルスゲノム操作によるウイルス学的展開
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12770153
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
河野 光雄 三重大学, 医学部, 講師 (00234097)
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| Keywords | rPIV2 / rPIV2V(-) / rPIV2(ΔM) / リバースジェネティクス / ウイルスベクター / ワクチン |
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| Research Abstract |
前年度に確立したリバースジェネティクスを用いてリコンビナントパラインフルエンザ2型ウイルス(rPIV2)とV蛋白特異的領域(約60アミノ酸)を欠損させたウイルス[rPIV2V(-)]を作製し、これらのウイルスの性状を比較した。野生株様のrPIV2は、インターフェロン(IFN)シグナリングにおけるSTAT2のプロテオソームディグラデーションもしくは蛋白の翻訳阻害によりIFNに抵抗性を示したが、一方rPIV2V(-)はIFNに対して高い感受性を示した。このことからV蛋白のカルボキシ末端に位置するその特異的領域がIFNシグナリング阻害に非常に重要な領域であることが示唆された。また、Vero細胞を用いての感染実験において、感染細胞内でのウイルスmRNA及び蛋白合成量は両者間でほとんど差はみられなかったが、その培養上清中にリリースされたrPIV2V(-)粒子数は100〜200倍減少した。さらに、免疫電顕により確認されたrPIV2V(-)Virionの径は有意に大きくなっており、V蛋白のその領域はウイルス粒子のassemblyにも関与していることが示唆された。また、本年度はワクチン化及びウイルスベクター化に向けてT7ポリメラーゼの供給源としてワクシニアウイルスを用いない系を確立し、M蛋白のカルボキシ末端119アミノ酸を欠損させたウイルス(rPIV2ΔM119)を作製しM蛋白の機能について調べた。rPIV2ΔM119は、培養上清中へリリースされるVirionの数が著しく減少し、その値は先に示したrPIV2V(-)よりも10倍程度低かった。さらにrPIV2ΔM119感染細胞に、M蛋白発現細胞を加えて供培養することにより、リリースされるVirion量が10倍程度増加した。これらの結果からM蛋白がVirionのassemblyおよびBuddingに関与していることが示唆された。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Nanba K.et al.: "Involvement of ADAM9 in multinucleated giant cell formation of blood monocytes"Cell Immunol.. 213(2). 104-113 (2001)
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[Publications] Nishio M.et al.: "High resistance of human parainfluenza type 2 virus protein-expressing cells to the antiviral and anti-cell proliferative activities of alpha/beta interferons:cysteine-rich V-specific domain is required for high resistance to the interferons"J Virol.. 75(19). 9165-9176 (2001)
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[Publications] Tsurudome M.et al.: "Hemagglutinin-neuraminidase-independent fusion activity of simian virus 5 fusion(F)protein:difference in conformation between fusogenic and nonfusogenic F proteins on the cell surface"J Virol.. 75(19). 8999-9009 (2001)
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[Publications] Kawano M.et al.: "Recovery of infectious human parainfluenza type 2 virus from cDNA clones and properties of the defective virus without V-specific cysteine-rich domain"Virology. 284(1). 99-112 (2001)
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[Publications] Mori K.et al.: "Cross-talk between RANKL and FRP-1/CD98 systems:RANKL-mediated osteoclastogenesis is suppressed by an inhibitory anti-CD98 heavy chain mAb and CD98-mediated osteoclastogenesis is suppressed by osteoclastogenesis inhibitory factor"Cell Immunol.. 207(2). 118-126 (2001)
