HHV-6がコードしているウイルスケモカインの機能解析

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12770154
• Research Institution: Hyogo Medical University
• Principal Investigator: 鄒 平 兵庫医科大学, 医学部, 助手 (40322185)
• Keywords: HHV-6 / U83 / MRP14 / Jab-1 / AP-1

Research Abstract

我々はHHV-6BのU83についてウイルス感染細胞における発現動態と機能解析した結果、U83遺伝子産物はウイルス感染後期に発現し、単核球細胞系THP-1細胞にCa Fluxやchemotaxis作用を誘導することが明らかにした。この結果よりU83はHHV-6の病原性や感染機構に深く関与していることが示唆された。本研究はU83遺伝子について機能をさらに明らかにすることを目的とした。U83に対するreceptorの同定を行った。報告されているchemokine receptor cDNAを真核細胞発現vector pCEP4に組み込み、chemokine receptorを持たないK562にtransfectionし、Hygromycinでselectionした後、精製したU83-Fc蛋白を用いて、chemokineの活性やBinging assayについてを検討したが、現在のところ、U83対するreceptorを明らかにされていない。Yeast two-hybrid systemを利用しU83と相互作用する因子をスクリーニングしました。U83遺伝子をbaitとしたtwo-hybrid screeningの結果、yeastにおいて特異的にU83と相互作用する宿主細胞因子migration inhibitory related protein(MRP14)を同定した。U83とMRP14の相互作用はin vivo co-immunoprecipitation法にて確認された。MRP14機能について検討したところ、MRP14はJab1と特異的に相互作用すること、Jab1によってAP-1 activationを抑制することが明らかとなった。また、MRP14によりAP-1 activationの抑制はU83によってblockすることが明らかとなった。この研究成果は現在、投稿準備中である。生物個体レベルで、U83はHHV-6が示す病態の影響についてU83トランスジエニックマウスの作成は現在進行中である。