2000 Fiscal Year Annual Research Report

アルツハイマー病原因遺伝子による神経細胞死に対する拮抗遺伝子と分子装置の解明

Research Project

Project/Area Number	12770326
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	橋本祐一慶應義塾大学, 医学部, 助手 (00317330)
Keywords	アルツハイマー病 / アミロイド前駆体蛋白質 / プレセリン / 神経細胞死 / スクリーニング
Research Abstract	今年度は、まず、2種類のFAD-APP変異体[V642I APPとK595N/M596L APP(NL APP)](Hashimoto et a1.JBC,2000)、APPのN末端領域を認識するモノクローナル抗体22C11(Sudo et al.MCN,2000)、およびアポリポプロテインE4(Hashimoto et al.JN,2000)が惹起する神経細胞死メカニズムの検討を行った。次に、我々が樹立したエクダイソン(EcD)処理することで家族性アルッハイマー病(FAD)の原因遺伝子であるV642I APPを誘導的に発現することで細胞死が誘導出来る神経細胞株F11/EcR/V642I[Niikura,T et al.BBRC,2000)と、アルツハイマー病と確定診断された患者の後頭葉からのmRNAを鋳型にしたcDNAライブラリーを用いて細胞死拮抗遺伝子のスクリーニングを行った。その結果、V642I APPの一過性発現によって誘導される細胞死拮抗活性を有する遺伝子が数種類単離出来た。その中で、分泌性の24アミノ酸からなるペプチドをコードし、さらに他のFADの原因遺伝子(NL APP、M146L PS1およびN141I PS2)やAβに対しても拮抗作用が認められる遺伝子をHumanin(HN)と名付け、その遺伝子(pHN)および合成ペプチド(sHN)を作成し、細胞死拮抗活性ならびにその臨床応用可能性について検討を行った。また、HNの構造活性相関を検討する目的でSer14をGlyに置換した変異体(pHNG、sHNG)とCys8をAlaに置換した変異体(pHNA、sHNA)を作成した。上記4種類のFAD原因遺伝子とAβ(1-43)が誘導する細胞死を、sHNは10μMで、sHNGは10nMで完全に抑制し、sHNAでは拮抗活性が消失した。また、pHNとsHNは家族性筋萎縮性側索硬化症の原因遺伝子であるSOD1の変異体やハンチントン舞踏病などのモデル遺伝子であるポリグルタミン遺伝子が誘導する細胞死には拮抗出来なかった。これらのことから、1)HNはアルツハイマー病特有の神経細胞死に対し極めて特異的に拮抗出来ること、2)HNが厳密な構造活性相関を有する分子であること、を示している。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Sudo,H et al.: "Secreted Aβ does not mediate neurotoxicity by antibody-stimulated amyloid precursor protein."Biochemical and Biophysical Research Communications. (In press). (2000)
[Publications] Hagiwara.A et al.: "Neuronal cell apoptosis by a receptor-binding domain peptide of apoE4 not through LDL receptor-related protein."Biochemical and Biophysical Research Communications. 278・3. 633-639 (2000)
[Publications] Hashimoto,Y et al.: "Neuronal apoptosis by apolipoprotein E4 through low-density lipoprotein receptor-related protein and heterotrimeric GTPases."The Journal of Neuroscience. 20・22. 8401-8409 (2000)
[Publications] Sudo,H et al.: "Antibody-regulated neurotoxic function of cell-surface β-amyloid precursor protein."Molecular and Cellular Neuroscinence. 16・6. 708-723 (2000)
[Publications] Hashimoto,Y et al.: "Multiple mechanisms underlie neurotoxicity by different types of Alzheimer's disease mutations of amyloid precursor protein."The Journal of Biological chemistry. 275・44. 34541-34551 (2000)
[Publications] Niikura,T et al.: "V642I APP-Inducible Neuronal Cells : A Model System for Investigating Alzheimer's Disorders."Biochemical and Biophysical Research Communications. 274・44. 445-454 (2000)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

アルツハイマー病原因遺伝子による神経細胞死に対する拮抗遺伝子と分子装置の解明

Principal Investigator

橋本 祐一 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (00317330)

Research Products

[Publications] Sudo,H et al.: "Secreted Aβ does not mediate neurotoxicity by antibody-stimulated amyloid precursor protein."Biochemical and Biophysical Research Communications. (In press). (2000)

[Publications] Hagiwara.A et al.: "Neuronal cell apoptosis by a receptor-binding domain peptide of apoE4 not through LDL receptor-related protein."Biochemical and Biophysical Research Communications. 278・3. 633-639 (2000)

[Publications] Hashimoto,Y et al.: "Neuronal apoptosis by apolipoprotein E4 through low-density lipoprotein receptor-related protein and heterotrimeric GTPases."The Journal of Neuroscience. 20・22. 8401-8409 (2000)

[Publications] Sudo,H et al.: "Antibody-regulated neurotoxic function of cell-surface β-amyloid precursor protein."Molecular and Cellular Neuroscinence. 16・6. 708-723 (2000)

[Publications] Hashimoto,Y et al.: "Multiple mechanisms underlie neurotoxicity by different types of Alzheimer's disease mutations of amyloid precursor protein."The Journal of Biological chemistry. 275・44. 34541-34551 (2000)

[Publications] Niikura,T et al.: "V642I APP-Inducible Neuronal Cells : A Model System for Investigating Alzheimer's Disorders."Biochemical and Biophysical Research Communications. 274・44. 445-454 (2000)

橋本祐一慶應義塾大学, 医学部, 助手 (00317330)