アクチン結合蛋白質Fascinの発現制御と乳癌・前立腺癌細胞の運動能に関する研究

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12770672
• Research Institution: St. Marianna University School of Medicine
• Principal Investigator: 橋詰 倫太郎 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助手 (50288180)
• Keywords: Fascin / TCF / NF-kB / 乳癌 / 前立腺癌

Research Abstract

1.Fascin遺伝子のプロモーター解析
Fascin遺伝子のプロモーターおよび第1イントロン領域に認めるTCFおよびNF-kBのconsensus binding sitesを含むLuciferase repoter geneを作成し、実際にFascin蛋白質の発現が増加しているc-erbB2過剰発現乳癌細胞(eb2)およびホルモン非依存性前立腺癌細胞(LN3)においてLuciferase assayを行った。
1)eb2細胞では,内因性のTCFおよびNF-kB転写活性は母細胞に比し有意に増加していたが、Fascin reporter活性には有意な差を認めず、これら転写因子とFascin蛋白質発現との関連性は得られなかった。
2)LN3細胞では、Fascin reporter活性がホルモン依存性細胞に比し約4倍高くFascin蛋白質の高発現と一致した結果が得られた。またLN3細胞では内因性TCF転写活性は低く、NF-kB転写活性は高値を示した。そこでTCFおよびNF-kB発現ベクターをFascin repoter geneと各々co-transfectionした結果、TCFの発現によりFascin repoter活性は有意に低下し、TCF転写因子がFascin geneの転写活性を抑制する可能性が示唆された。一方、NF-kBはFascin repoter活性に特異的な作用を示さなかった。現在、我々はTCFのDNA binding siteにpoint mutationをもつ変異ベクターを作成し、上記の可能性を検証中である。
2.乳癌組織におけるFascin蛋白質発現と臨床病理学的因子との相関関係
Fascin蛋白質は、ERおよびPR陰性乳癌おいて有意に発現していた(P<0.0001)。またflow cytometory解析の結果、non-diploid乳癌にFascin蛋白質発現を有意に認めた(P=0.03)。

Research Products

• [Publications] Axel Grothey: "C-erbB-2/HER-2 upregulates fascin, an actin-bundling protein associated with cell motility, in human breast cancer cell lines"Oncogene. 19(42). 4864-4875 (2000)
• [Publications] Axel Grothey: "Fascin, an actin-bundling protein associated with cell motility, is upregulated in hormone receptor negative breast cancer"British Journal of Cancer. 83(7). 870-873 (2000)
• [Publications] Rintaro Hashizume: "The RING Heterodimer BRCA1-BARD1 Is a Ubiquitin Ligase Inactivated by a Breast Cancer-derived Mutation"Journal of Biological Chemistry. 276(18). 14537-14540 (2001)
• [Publications] 太田智彦: "BRCA1のもう一つの機能-ユビキチンリガーゼ活性-"細胞工学. 20(6). 854-856 (2001)