歯周病原性細菌由来の赤血球凝集因子/細菌共凝集因子に対するヒト型抗体の作製

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12771326
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 日野 孝宗 広島大学, 歯学部, 助手 (20274102)
• Keywords: 歯周病原性菌 / 赤血球凝集素 / F. nucleatum / 共凝集 / ヒト型抗体 / 赤血球凝集素

Research Abstract

歯周病原性菌由来の赤血球凝集,細菌共凝集因子は歯周局所での細菌バイオフィルム形成に関与する。F.nucleatum由来のL-arginine感受性赤血球凝集素(A-HA)は強力な赤血球凝集因子であり,細菌共凝集にも関係している。本研究はこのA-HAを標的としたヒト型抗体による歯周病の受動免疫療法の開発に向けて,その有効性を検討するため,以下の基礎的実験を行った。
1.抗A-HAラビットポリクローナル抗体はF.nucleatumと赤血球との凝集だけでなく,C.rectus, P.gingivalis, P.intermediaおよびE. corrodensとの共凝集も阻害した。
2.歯周病患者血清抽出ヒトIgG抗体もポリクローナル抗体と同様に両凝集を阻害した。
3.抗A-HA抗体を有する患者に特異なHLA classII遺伝子型はみられなかった。
4.A-HAに対するマウスモノクローナル抗体をマウスミエローマ31とマウスBalb/c鼠径リンパ節細胞とのfusionによるハイブリドーマから作製した。
5.歯周病原性菌の共培養による細菌バイオフィルム形成実験(in vitro)を確立させた。
抗A-HA抗体の赤血球凝集および細菌共凝集の阻害応答から,抗A-HA抗体が細菌バイオフィルム形成阻害に有効であることが示唆された。また,患者血清抽出抗体も両凝集を阻害し,ヒトB細胞からのヒト型抗体クローン作製は,その後のA-HAを標的とした単クローン抗体を用いた受動免疫療法に有用である。

Research Products

• [Publications] Munemasa, T., et al.: "Adeherence of Bacteroides forsythus to host cells"Microbios. 101. 115-126 (2000)
• [Publications] 川本 亨, 他: "自己抗体を有する歯周炎患者のHLA classII遺伝子型"日本歯科保存学雑誌. 43. 57 (2000)
• [Publications] Okada, M., et al.: "Clinical periodontal findings and microflora profiles in children with chronic neutropenia under supervised oral hygiene"J.Periodontol.. 72. 945-952 (2001)