2000 Fiscal Year Annual Research Report
ニューロトロフィン受容体によるNF-κBの核移行制御機構の研究
| Project/Area Number |
12771384
|
|---|
| Research Institution | Nagoya City University |
|---|
Principal Investigator |
古野 忠秀 名古屋市立大学, 薬学部, 講師 (80254308)
|
|---|
| Keywords | NF-κB / 蛍光蛋白質 / 共焦点レーザ顕微鏡 / TNF-α / プロテアソーム / NGF / ニューロトロフィン / 核移行 |
|---|
| Research Abstract |
NF-κBは通常は細胞質に存在しており、細胞が活性化されると細胞質から核に移行して転写因子としての機能を発揮し、適切な細胞応答を誘導することが知られている。申請者らは、NF-κBのサブユニットの一つであるp50の前駆体蛋白質p105とGFPのキメラ蛋白質(GFP-p105)をラット副腎髄質褐色細胞腫(PC12細胞)に安定発現させ(PC12-NF2細胞)、腫瘍壊死因子(TNF-α)刺激に伴うNF-κBの細胞質から核への移行を観察した。その結果、TNF-αを添加すると、約10分のlag-timeの後、細胞質に局在していたGFP-p105が徐々に核移行し始め、45分後には核移行がほぼ飽和に達することが分かった。この核移行はプロテアソーム阻害剤のlactacystinを前処理によりほぼ完全に抑制された。また、PC12細胞は神経成長因子(NGF)存在下で培養すると交感神経細胞に分化するが、神経細胞に分化したPC12-NF2細胞の方が分化していない細胞よりもNF-κBの核移行が効率よく起こることが分かった。一方、分化していないPC12細胞にTNF-αとNGFの共刺激を与えると、核移行効率が増大することも分かった。このことから、PC12細胞の分化に伴って細胞膜上への発現量が増大するニューロトロフィン受容体のp75NTRがNF-κBの核移行に関与していると考えられた。次年度は、p75NTRがTNF受容体のシグナル伝達に対してどのように作用してNF-κBの核移行を制御しているかを明らかにし、p75NTRによるNF-κBの核移行の制御機構を解明することを目的とする。
|
-
[Publications] Dace,A.,Zhao,L.,Park,K.S.,Furuno,T.,Takamura,N.,Nakanishi,M.,West,B., et al.: "Hormone binding induces rapid proteasome-mediated degradation of thyroid hormone receptors."Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 97. 8985-8990 (2000)
-
[Publications] Ohshiro,H.,Suzuki,R.,Furuno,T.,Nakanishi,M.: "Atomic force microscopy to study direct neurite-mast cell (RBL) communication in vitro."Immunol.Lett.. 74. 211-214 (2000)
-
[Publications] Suzuki,R.,Furuno,T.,Teshima,R.,Nakanishi,M.: "Bi-directional flow of in vitro mast cell-nerve communication observed by confocal laser scanning microscopy."Biol.Pharm.Bull.. 24. 291-294 (2001)
-
[Publications] Furuno,T.,Hirashima,N.,Onizawa,S.,Sagiya,N.,Nakanishi,M.: "Nuclear shuttling of mitogen-activated protein (MAP) kinase (extracellular signal-regulated kinase (ERK) 2) was dynamically controlled by MAP/ERK kinase after antigen stimulation in RBL-2H3 cells."J.Immunol.. (in press). (2001)
-
[Publications] Amano,T.,Furuno,T.,Hirashima,N.,Ohyama,N.,Nakanishi,M.: "Dynamics of intracellular granules with CD63-GFP in rat basophilic leukemia cells."J.Biochem.. (in press). (2001)
