セルロース分解細菌におけるセルラーゼ遺伝子の発現制御機構の解明

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12839005
• Research Institution: Mie University
• Principal Investigator: 苅田 修一 三重大学, 生物資源学部, 講師 (90233999)
• Keywords: Clostrdium / カタボライト調節蛋白質 / 嫌気性細菌 / ccpA遺伝子 / セルラーゼ / キシラナーゼ / キチナーゼ

Research Abstract

本年度は、昨年度精製したカタボライト調節蛋白質CcpAの特性について検討を行った。Bacillus subtilis由来のカタボライト調節シスエレメントであるamyEや、セルロソームの骨格蛋白質のプロモータ領域を用いたゲルシフトアッセイを行った。しかしながら、シフトシグナルを確認することができず、本CcpAがトランス因子であるかどうかを確認することができなかった。CcpA蛋白質が単独で機能しない可能性もあり今後の課題である。一方、カタボライト調節のセンサー的な役割をすると考えられるホスホエノールピルビン酸依存性リン酸転位システム(PTS)の酵素遺伝子のクローニングを試みたところ、ホスホエノールピルビン酸のリン酸転位酵素であるPTS酵素I、ならびに、グルコースの取り込みに関与するPTS酵素IIの遺伝子をクローニングできた。このことは、嫌気性セルロース分解細菌においてPTSが存在していることを示している。また、嫌気性キチン分解菌からも同様な方法でクローニングを試みた結果、同様にCcpA遺伝子が存在しており、キチナーゼの発現においても同様な制御系が存在していることを示唆した。