遺伝子治療の有効性を評価するためのジーンイメージングの開発

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12877144
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 久保 敦司 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90051771)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中村 佳代子 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (20124480)
• Keywords: 遺伝子治療 / ジーンイメージング / Tc-99m / mdr / 多剤耐性 / アンチセンス / P-糖たんぱく質

Research Abstract

本研究はRI標識した遺伝子、RI標識したキャリアー物質、遺伝子発現のたんぱく質を核医学検査的に追跡して、遺伝子治療の評価を行う「ジーンイメージング」を確立する事を目的としている。前年度の研究結果を受けて、引き続き研究を続行し、以下の結果を得た。
1.ヒト類上皮癌細胞KB-31と、これに多剤耐性遺伝子mdr-1をトランスフェクトしたKB-G2をmdr-1に対するアンチセンスのオリゴヌクレオチド[a-o]、または、センスのオリゴヌクレオチド[s-o]とインキュベートして、mdr-1の発現たんぱく質であるP-糖たんぱく質の<機能>を、その基質であるTc-99m-MIBIを用いて検討した結果;
(1)KB-G2の<機能>は[a-o]によって抑制され、この程度は[a-o]の投与量に依存した。また、[s-o]の効果は全く認められなかった。
(2)KB-31の<機能>は[a-o]、[s-o]に対して、いずれの効果も認められなかった。
(3)(1)、(2)より[a-o]のアンチセンス効果としての特異性が証明された。
2.上記の[a-o]と[s-o]とをMAG3のリガンドを用いて、Tc-99mにて標識し、双方の細胞とインキュベートした結果;
(1)KB-G2にはTc-99m-[a-o]が取り込まれ、Tc-99m-[s-o]は取り込まれなかった。
(2)KB-31にはTc-99m-[a-o]、Tc-99m-[s-o]のいずれも取り込まれなかった。
(3)(1)、(2)より[a-o]がmdr-1に特異的に結合して取り込まれることが示唆された。
これらの結果は目的とするDNAの局在をRI標識アンチセンス法によって、世界で初めて証明したものである。

Research Products

• [Publications] 中村 佳代子: "遺伝子と臨床核医学(9):クローン、クローニング、cDNA"臨床核医学. 35(2). 27-29 (2002)
• [Publications] 中村 佳代子: "遺伝子と臨床核医学(10):標識、ニックトランスレーション"臨床核医学. 35(3). 44-45 (2002)
• [Publications] 中村 佳代子: "遺伝子と臨床核医学(11):オリゴヌクレオチド、標識"臨床核医学. 35(4). 57-58 (2002)
• [Publications] 中村 佳代子: "遺伝子と臨床核医学(12):アンチセンス、オリゴヌクレオチド"臨床核医学. 35(6). 92-93 (2002)
• [Publications] 藤井 博史: "半導体検出器を搭載したイメージングプローブによるセンチネルリンパ節画像化の検討"臨床放射線. 47(12). 1725-1733 (2002)
• [Publications] Yuko Kitagawa: "Intraoperative lymphatic mapping and sentinel lymph node sampling in esophageal and gastric cancer"Sur Oncol Clin N Am. (11). 293-304 (2002)
• [Publications] Kayoko Nakamura: "Prediction of response to radiation therapy by using subsequent Tc-99m-HL91 scintigraphy"Journal of Nuclear Medicine. 43(5). 278 (2002)
• [Publications] Kayoko Nakamura: "Characterization of Tc-99m-phytate solution for the sentinel node detection"European Journal of Nuclear Medicine. 29(S1). S99 (2002)
• [Publications] Kayoko Nakamura: "Can Tc-99m-MIBI assess MDR-modulators?"European Journal of Nuclear Medicine. 29(S1). S381 (2002)
• [Publications] 中村 佳代子<分担>: "Sentinel Node Navigation-癌治療への新しい展開-センチネルリンパ節の核医学的検出に用いる放射性医薬品"金原出版株式会社. 296 (2002)
• [Publications] 久保 敦司: "Sentinel Node Navigation -がん治療への新しい展開-"金原出版株式会社. 296 (2002)