2013 Fiscal Year Annual Research Report
魚類の卵黄蛋白・脂質蓄積に関与するリポ蛋白質受容体アダプター蛋白に関する研究
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12J01961
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
水田 紘子 北海道大学, 大学院水産科学院, 特別研究員(DC2)
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| Keywords | ビテロジェニン受容体 / ARH / 卵黄形成 / 魚類繁殖生理 / エンドサイトーシス |
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| Research Abstract |
卵生脊椎動物において、ビテロジェニン(Vtg)は、その受容体(Vtgr)を介したエンドサイトーシスにより卵母細胞内に取り込まれ卵黄を形成する。一般に、リポ蛋白質受容体(LR)はリガンドと結合すると、LRアダプター蛋白質やクラスリンと呼ばれるエンドサイトーシス関連因子と複合体を形成し、エンドサイトーシスを開始する。最近、アフリカツメガエルにおいて、LRアダプター蛋白質の一つである常染色体劣性高コレステロール血症原因蛋白質(Arh)が、Vtgrを介したVtgのエンドサイトーシスに関与することが示唆された。本研究では、魚類の卵黄形成を開始あるいは制御する因子の候補としてArhに着目し、その生化学的性状を明らかにすることを目的とした。
卵巣抽出液を試料として抗Arh抗体(a-Arh)を用いたWestern blot法に供した結果、還元処理下において、Arhの推定分子量と近い約36 kDaの蛋白質バンドを検出した。この抗体を用いて免疫組織化学的手法に供し、Arhの卵巣における局在を調べた結果、Arhは卵黄形成に関与しない可能性が示唆された。そこで、他に卵黄形成に関与するArhのサブタイプが存在する可能性を考え、再度Arh遺伝子のクローニングを行った。その結果、新たに一種類のArh様遺伝子が得られた。そこで、先に得たものをArh I、後に得たものをArh IIとし、これらの発現解析を行った。その結果、Arh IIはVtgrと良く似た発現パターンを示し、このことから、卵母細胞におけるVtgrを介したVtgのエンドサイトーシスに特にArh IIが関与する可能性が示された。
以上、本実験では本種卵巣に発現する二種Arhの発現動態を魚類で初めて明らかにした。研究の成果は、魚類卵巣におけるVtgrを介したVtgのエンドサイトーシス機構に関して新たな基礎的知見を提供した。
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| Strategy for Future Research Activity |
(抄録なし)
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[Journal Article] Ovarian expression and localization of a vitellogenin receptor with eight ligand binding repeats in the cutthroat trout (Oncorhynchus clarki)2013
Author(s)
Mizuta, H., Luo, W., Ito, Y., Mushirobira, Y., Todo, T., Hara, A., Reading, B. J., Sullivan, C. V., Hiramatsu, N.
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Journal Title
Comparative Biochemistry and Physiology-Part B
Volume: 166
Pages: 81-90
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Molecular cloning and partial characterization of an ovarian receptor with seven ligand repeats, an orthologue of low-density lipoprotein receptor, in the cutthroat trout (Oncorhynchus clarki)2013
Author(s)
Luo, W., Ito, Y., Mizuta, H., Massaki, K., Hiramatsu, N., Todo, T., Reading, B. J., Sullivan, C. V., Hara, A.
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Journal Title
Comparative Biochemistry and Physiology-Part A
Volume: 166
Pages: 263-271
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Ligand binding properties of ovarian lipoprotein receptors in the cutthroat trout (Oncorhynchus clarki)2013
Author(s)
Mushirobira, Y., Mizuta, H., Luo, W., Todo, T., Hara, A. and Hiramatsu, N.
Organizer
The 10th International Meeting on Reproductive Biology of Aquatic Animals of the East China Sea
Place of Presentation
済州国際大学(韓国)
Year and Date
20131118-20
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[Presentation] Yolk formation in fish : Multiple vitellogenins and their receptors2013
Author(s)
Hiramatsu, N., Mizuta, H., Luo, W., Nishimiya, O., Wu, Meiqin, Mushirobira, Y., Reading, B. J., Sullivan, C. V., Todo, T., and Hara, A.
Organizer
Diversification in Inland Finfish Aquaculture II (DIFAII)
Place of Presentation
南ボヘミア大学(チェコ)
Year and Date
20130924-26
Invited
