2013 Fiscal Year Annual Research Report
下垂体未分化細胞の分化転換における組織特異的転写因子PROP1の機能解析
Project/Area Number |
12J10032
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Research Institution | Meiji University |
Principal Investigator |
吉田 彩舟 明治大学, 農学研究科, 特別研究員(DC1)
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Keywords | 下垂体 / 幹・前駆細胞 / Niche / 発生・分化 / ephrin/Eph Receptor signal / 組織特異的転写因子 / 標的遺伝子 |
Research Abstract |
本研究は下垂体特異的転写因子PROP1の幹・前駆細胞における機能解析ならびに、それら幹・前駆細胞を支持する微小環境Nicheの解析を目的としている。具体的には1. ChIP-on-chip法を用いたPROP1の標的遺伝子探索、さらに、2. Nicheで特異的に機能するシグナル分子の同定と機能解析を行う。本年度の研究成果は以下の通りである。 1. PROP1の標的遺伝子探索ならびにPROP1陽性細胞の機能解析 : これまでに我々はPROP1に対する抗血清を作製しており、本抗体を用いたChIP-on-chip系による標的遺伝子探索を進めている。本年度はChIP-on-chipの系を改良し、次世代版であるChIP-Seqによる網羅的解析の準備を行った。また、それと並行して、PROP1陽性細胞の機能解析を目的とした組織化学的解析の結果、PROP1陽性細胞が胎仔期の主要な細胞供給源であることを見出し、原著論文として報告した。 2. Nicheで特異的に機能するシグナル分子の同定と機能解析 前年度は下垂体ならびに下垂体由来非ホルモン産生株のマイクロアレイ解析を実施した。本年度はその結果から、下垂体由来株化細胞Tpit/Eが下垂体幹・前駆細胞のモデル細胞であることを見出し、原著論文として報告した。また、下垂体幹・前駆細胞Nicheで機能するシグナル伝達分子の候補としてephrin/Eph Receptorを見出し、局在解析の結果、ephrin-B2/Eph Receptor B3の組み合わせが、Nicheにおいて特異的に発現していることを見出した。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
現時点では標的遺伝子の絞り込みは終了していないが、計画よりも効率的なChIP-Seq系での解析が可能となったことから、また、前年度のマイクロアレイ解析から選抜した遺伝子の中から、幹・前駆細胞を支持するNicheで機能するシグナル分子ephrin-B2/Eph Receptor B3を同定したことから、おおむね順調に進展しているとした。
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Strategy for Future Research Activity |
来年度はChlP-Seqによる下垂体特異的転写因子PROP1の標的遺伝子の探索を展開する。また、前年度に同定した下垂体幹・前駆細胞Nicheて発現、機能するシグナル分子ephrin-B2/Eph Receptor B3に関して、そのシグナル系がNicheにおいてどのような役割を担うのかを、前年度に同定した下垂体幹・前駆細胞のモデル細胞Tpit/Eや下垂体の組織スライスを用いて、活性化ならびに阻害実験を行い、解析する。
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[Journal Article] Characterization of Murine Pituitary-Derived Cell Lines, Tpit/F1, Tpit/E and TtT/GF.2014
Author(s)
Saishu Yoshida, Masashi Higuchi, Hiroki Ueharu, Naoto Nishimura, Mitsuyoshi Tsuda, Hideji Yako, Mo Chen, Hideo Mitsuishi, Yoshiya Sano, Takako Kato, Yukio Kato.
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Journal Title
Journal of Reproduction and Development
Volume: (印刷中)
Peer Reviewed
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[Journal Article] GFP-expressing S100β-positive cells of the rat anterior pituitary differentiate into hormone-producing cells.2014
Author(s)
Masashi Higuchi, Naoko Kanno, Saishu Yoshida, Hiroki Ueharu, Mo Chen, Hideji Yako, Shioh Shibuya, Masayo Sekita, Mitsuyoshi Tsuda, Hideo Mitsuishi, Naoto Nishimura, Takako Kato, Yukio Kato.
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Journal Title
Cell and Tissue Research
Volume: (印刷中)
Peer Reviewed
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[Journal Article] Isolation of dendritic-cell-like S100β-positive cells in rat anterior pituitary gland.2014
Author(s)
Kotaro Horiguchi, Ken Fujiwara, Saishu Yoshida, Masashi Higuchi, Takehiro Tsukada, Naoko Kanno, Takashi Yashiro, Kozue Tateno, Shunji Osako, Takako Kato, Yukio Kato
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Journal Title
Cell and Tissue Research
Volume: (印刷中)
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Expression of chemokine CXCL10 in dendritic-cell-like S 100β-positive cells in rat anterior pituitary gland.2014
Author(s)
Kotaro Horiguchi, Ken Fujiwara, Masashi Higuchi, Saishu Yoshida, Takehiro Tsukada, Hiroki Ueharu, Mo Chen, Rumi Hasegawa, Shu Takigami, Shunji Ohsako, Takashi Yashiro, Takako Kato, Yukio Kato.
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Journal Title
Cell and Tissue Research
Volume: (印刷中)
Peer Reviewed
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[Journal Article] Characterization of a pituitary-tumor-derived cell line, TtT/GF, that expresses Hoechst efflux ABC transporter subfamily G2 and stem cell antigen 1.2013
Author(s)
Hideo Mitsuishi, Takako Kato, Mo Chen, Li-yi Cai, Hideji Yako, Masashi Higuchi, Saishu Yoshida, Naoko Kanno, Hiroki Ueharu, Yukio Kato.
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Journal Title
Cell and Tissue Research
Volume: 354
Pages: 563-572
Peer Reviewed
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[Journal Article] Detection of human herpesviruses (HHVs) in semen of human male infertile patients.2013
Author(s)
Mo Chen, li-yi Cai, Naoko Kanno, Takako Kato, Lu Jinxing, Jin Fan, Wang Honghua, Masayo Sekita, Masashi Higuchi, Saishu Yoshida, Hideji Yako, Hiroki Ueharu, Izumi Shun-Ichiro, Yukio Kato.
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Journal Title
Journal of Reproduction and Development
Volume: 59
Pages: 457-462
Peer Reviewed
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