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2014 Fiscal Year Annual Research Report

発現プロファイル解析による植物共生菌分泌タンパク質の共生成立における機能の解明

Research Project

Project/Area Number 12J40172
Research InstitutionNagoya University

Principal Investigator

竹本(田中) 愛子  名古屋大学, 生命農学研究科, 特別研究員(RPD)

Project Period (FY) 2012-04-01 – 2015-03-31
Keywords共生 / 転写制御因子
Outline of Annual Research Achievements

1. ProAに発現制御を受ける遺伝子群の機能解析
先に、Epichloё festucaeにおいて宿主植物との共生確立に必須であるZn(II)2Cys6タイプの転写制御因子をコードする遺伝子ProAを同定した。本研究では、E. festucaeにおいて、ProAがどのように宿主植物との共生確立に関わっているかを明らかにするため、野生株およびproA変異株感染サンプルのRNA-seqを実施した。本年度は、さらに、E. festucae野生株の培養時の発現プロファイルデータを得た。E. festucaeゲノム上の9,350遺伝子の発現パターンから、宿主植物感染時に発現が誘導され、proA変異により発現が顕著に抑制される191遺伝子を特定した。それらのうち58遺伝子にコードされるタンパク質は、N末端に分泌シグナルを有していた。これらのうち、25遺伝子は全長が200アミノ酸以下のタンパク質をコードしており、核輸送シグナル配列を有するものも複数見出された。これら25遺伝子のうち10遺伝子について変異株を作成したところ、proA変異株と同様に宿主植物の矮化・枯死を引き起こす変異株が得られた。

2. ProAに直接発現制御を受ける遺伝子群の同定
ProAタンパク質が、直接結合するプロモーター配列の回収(ChIP)はすでに成功している。そこで、1の解析により同定された分泌タンパク質をコードする遺伝子群について、ChIP-PCR実験を実施したところ、複数の遺伝子群のプロモーター領域が高濃度で検出され、これら遺伝子群がProAタンパク質に直接制御される可能性が示された。しかしながら、次世代シークエンサーを用いた網羅的解析に必要なDNA量が回収できていないため、ChIP法の改善と並行して、本年度は、in vitroで結合反応を行うSELEX法を用い、プロモーター配列の回収を行った。SELEX法に必要なゲノムライブラリーを作成し、ProAタンパク質とタグとなるMBPとの融合タンパク質を用いて、ProA結合性プロモーター配列を回収した。

Research Progress Status

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

26年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (7 results)

All 2015 2014

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Acknowledgement Compliant: 2 results) Presentation (5 results)

  • [Journal Article] The Soybean mycorrhiza-inducible phosphate transporter gene, GmPT7, also shows localized expression at the tips of vein endings of senescent leaves.2014

    • Author(s)
      Inoue Y, Kobae Y, Omoto E, Tanaka A, Banba M, Takai S, Tamura Y, Hirose A, Komatsu K, Otagaki S, Matsumoto S, Taniguchi M, Masuta C, Ishimoto M and Hata S
    • Journal Title

      Plant and Cell Physiology

      Volume: 55 Pages: 2102-2111

    • DOI

      10.1093/pcp/pcu138

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Formation of arthroconidia during regeneration and selection of transformed Epichloë festucae protoplasts.2014

    • Author(s)
      Cartwright GM., Tanaka A., Eaton CJ and Scott, B.
    • Journal Title

      Fungal Biology

      Volume: 118 Pages: 462-471

    • DOI

      10.1016/j.funbio.2014.03.004

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] 牧草共生糸状菌Epichloё festucaeの共生確立変異株における菌糸融合関連遺伝子の発現解析2015

    • Author(s)
      榧野友香、亀岡慎一、岡村文音、尾崎よしの、小林光智衣、高木宏樹、寺内良平、田中愛子、Barry Scott、竹本大吾
    • Organizer
      平成27年度日本植物病理学会全国大会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2015-03-29 – 2015-03-31
  • [Presentation] Identification and characterization of a nuclear protein, NsiA, essential for hyphal fusion and symbiotic infection of endophytic fungus Epichloё festucae2015

    • Author(s)
      Ozaki Y, Tanaka A, Kameoka S, Okamura A, Kayano Y, Saikia S, Scott B and Takemoto D
    • Organizer
      25th Fungal Genetics Conference
    • Place of Presentation
      Pacific Grove, USA
    • Year and Date
      2015-03-17 – 2015-03-22
  • [Presentation] 牧草共生糸状菌Epichloё festucaeにおける菌糸融合欠損株の探索と共生確立能の解析2014

    • Author(s)
      岡村文音、田中愛子、竹本大吾
    • Organizer
      第14回糸状菌分子生物学コンファレンス
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      2014-11-15 – 2014-11-16
  • [Presentation] 牧草共生糸状菌Epichlё festucaeにおける菌糸融合欠損株群の共生確立能について2014

    • Author(s)
      岡村文音、田中愛子、竹本大吾
    • Organizer
      平成26年度日本植物病理学会関西部会
    • Place of Presentation
      富山
    • Year and Date
      2014-09-27 – 2014-09-28
  • [Presentation] 牧草共生糸状菌Epichloё festucaeのCdc42およびRacAの機能における相互作用因子結合能の重要性に関する解析2014

    • Author(s)
      榧野友香、田中愛子、竹本大吾
    • Organizer
      平成26年度日本植物病理学会全国大会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      2014-06-02 – 2014-06-04

URL: 

Published: 2016-06-01  

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