2001 Fiscal Year Annual Research Report

免疫グロブリン遺伝子における遺伝情報変換機構の解析

Research Project

Project/Area Number	13037020
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	木下和生京都大学, 医学研究科, 助手 (50293874)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	村松正道京都大学, 医学研究科, 学術振興会特別研究員
Keywords	抗体 / クラススイッチ / 体細胞突然変異 / AID / DNA組換え / RNA編集 / 人工基質 / 免疫学
Research Abstract	抗体の多様性を生む機構であるクラススイッチ組換えと体細胞突然変異に必須であるBリンパ球細胞特異的因子AIDの機能を解明するために、本来はクラススイッチ組換えを起こさないマウス線維芽細胞株NIH3T3細胞に外来性AID遺伝子を導入し、クラススイッチ組換えの人工基質上で組換えが起こるのか検討した。 NIH3T3細胞にテトラサイクリン誘導プロモーターにより組換え標的領域の転写を制御できる人工基質を導入し、これにレトロウイルスを用いてマウス由来AIDを強制発現した。その結果、標的領域の転写依存的に人工基質での組換えが起こることがフローサイトメトリーとPCR法により確認され、一方、シチジンデアミナーゼ酵素活性を有しない変異AID遺伝子を導入した場合には組換えが誘導されなかった。組換え点周辺の塩基配列の解析の結果、実際の抗体遺伝子におけるクラススイッチ組換え点と共通の特徴が認められ、クラススイッチ組換えと同じ機構が線維芽細胞で再現できたことが示された。このことはクラススイッチ組換えに必要なAID以外の因子は線維芽細胞にも存在することが明らかにした。RNA編集酵素との相同性から、AIDは組換え酵素のmRNAの編集を介して組換えを制御していると推測されていることを考慮すると、線維芽細胞にも組換え酵素の前駆体mRNAが発現していることが示唆される。この線維芽細胞をもちいたクラススイッチ組換えの実験系は免疫学の中心課題である抗体の多様化機構の解明に有用であると思われる。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] K.Kinoshita, T.Honjo: "Linking class-switch recombination with somatic hypermutation"Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2・7. 493-503 (2001)
[Publications] Lee, C.G., Kinoshita, K.et al.: "Quantitative regulation of class switch recombination by switch region transcription"Journal of Experimental Medicine. 194・3. 365-374 (2001)
[Publications] S.Fagarasan, K.Kinoshita, M.Muramatsu, K.Ikuta, et al.: "In situ class switching and differentiation to IgA producing cells in the gut lamina propria"Nature. 413・6856. 639-643 (2001)
[Publications] Kinoshita, K., Harigai, M., Muramatsu, M.et al.: "A hallmark of active class switch recombination: transcripts directed by I promoters on looped-out circular DNAs"Proceedings of National Academy of Science U.S.A.. 98・22. 12620-12623 (2001)
[Publications] Chen, X., Kinoshita, K., Honjo, T.: "Variable deletion and duplication at recombination junction ends: implication for staggered double-strand cleavage in class switch recombination"Proceedings of National Academy of Science U.S.A.. 98・24. 13860-13865 (2001)
[Publications] Okazaki, I., Kinoshita, K., Muramatsu, M.et al.: "The AID enzyme induces class switch recombination in fibroblasts"Nature. (in press). (2002)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

免疫グロブリン遺伝子における遺伝情報変換機構の解析

Principal Investigator

木下 和生 京都大学, 医学研究科, 助手 (50293874)

Research Products

[Publications] K.Kinoshita, T.Honjo: "Linking class-switch recombination with somatic hypermutation"Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2・7. 493-503 (2001)

[Publications] Lee, C.G., Kinoshita, K.et al.: "Quantitative regulation of class switch recombination by switch region transcription"Journal of Experimental Medicine. 194・3. 365-374 (2001)

[Publications] S.Fagarasan, K.Kinoshita, M.Muramatsu, K.Ikuta, et al.: "In situ class switching and differentiation to IgA producing cells in the gut lamina propria"Nature. 413・6856. 639-643 (2001)

[Publications] Kinoshita, K., Harigai, M., Muramatsu, M.et al.: "A hallmark of active class switch recombination: transcripts directed by I promoters on looped-out circular DNAs"Proceedings of National Academy of Science U.S.A.. 98・22. 12620-12623 (2001)

[Publications] Chen, X., Kinoshita, K., Honjo, T.: "Variable deletion and duplication at recombination junction ends: implication for staggered double-strand cleavage in class switch recombination"Proceedings of National Academy of Science U.S.A.. 98・24. 13860-13865 (2001)

[Publications] Okazaki, I., Kinoshita, K., Muramatsu, M.et al.: "The AID enzyme induces class switch recombination in fibroblasts"Nature. (in press). (2002)

木下和生京都大学, 医学研究科, 助手 (50293874)